Question

【题目】用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，灵敏度很高，在妊娠第8天就可以做出诊断，下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图（HCG：人绒毛膜促性腺激素）。

（1）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于___________，它能使小鼠产生___________细胞，此过程属于特异性免疫中的体液免疫。

（2）B细胞DNA合成途径有两条，途径①：由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，为DNA分子的合成提供原料（此途径可被氨基喋呤阻断）；途径②：利用次黄嘌呤和鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸，为DNA分子合成提供原料。骨髓瘤细胞DNA合成只有途径①。HAT培养基是指在普通动物细胞培养液中加入次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶脱氧核苷三种物质的液体培养基。

据此推测：若用A表示骨髓瘤细胞，B表示效应B细胞，加促融剂后，试管中的细胞类型有___________（用字母表示，不考虑三个及以上细胞融合类型）。在HAT培养液中，______________________类型细胞DNA 合成途径①被氨基喋呤阻断，虽然途径②正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般10天左右会死亡。___________类型细胞本身缺少DNA合成途径②，其途径①被___________阻断，所以不能增殖很快死亡。只有AB杂交瘤细胞能在HAT培养基中存活下来，原因是______________________。

Answer 1

【答案】抗原分泌相应抗体的淋巴（或浆或B淋巴）A、B、AA、BB、ABB、BBA、AA氨基喋呤杂交瘤细胞DNA合成途径有两条，虽然途径①被氨基喋呤阻断，但是途径②可合成DNA，保证杂交瘤细胞的不断分裂增殖

【解析】

单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注入小鼠体内，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞，利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，经过三次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞），②筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞，③筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。细胞融合是随机的，可能产生瘤、B、瘤瘤、BB、瘤B等不同类型细胞，在HAT培养基中培养，可筛选出杂交瘤细胞，得到既具有效应B细胞的分泌抗体的特性，又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖特性的杂交瘤细胞。

（1）给小鼠注射的HCG相当于抗原，可诱导小鼠产生能分泌相应抗体的效应B淋巴或浆细胞。

（2）若用A表示骨髓瘤细胞，B表示效应B细胞，加促融剂后，试管中的细胞类型有A、B、AA、BB、AB。由于A细胞可在体外增殖，B细胞无体外增殖的能力，因此在HAT培养液中，B、BB类型细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般10天左右会死亡；氨基喋呤可阻断途径①，故A、AA类型细胞本身缺少DNA合成途径②，途径①也被氨基喋呤阻断，最终也很快死亡。只有AB杂交瘤细胞能在HAT培养基中存活下来，原因是杂交瘤细胞DNA合成途径有两条，虽然途径①被氨基喋呤阻断，但是途径②可合成DNA，保证杂交瘤细胞的不断分裂增殖。