题目内容
【题目】用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”,灵敏度很高,在妊娠第8天就可以做出诊断,下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图(HCG:人绒毛膜促性腺激素)。
(1)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于___________,它能使小鼠产生___________细胞,此过程属于特异性免疫中的体液免疫。
(2)B细胞DNA合成途径有两条,途径①:由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸,为DNA分子的合成提供原料(此途径可被氨基喋呤阻断);途径②:利用次黄嘌呤和鸟嘌呤磷酸核苷转移酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸,为DNA分子合成提供原料。骨髓瘤细胞DNA合成只有途径①。HAT培养基是指在普通动物细胞培养液中加入次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶脱氧核苷三种物质的液体培养基。
据此推测:若用A表示骨髓瘤细胞,B表示效应B细胞,加促融剂后,试管中的细胞类型有___________(用字母表示,不考虑三个及以上细胞融合类型)。在HAT培养液中,______________________类型细胞DNA 合成途径①被氨基喋呤阻断,虽然途径②正常,但因缺乏在体外培养液中增殖的能力,一般10天左右会死亡。___________类型细胞本身缺少DNA合成途径②,其途径①被___________阻断,所以不能增殖很快死亡。只有AB杂交瘤细胞能在HAT培养基中存活下来,原因是______________________。
【答案】抗原分泌相应抗体的淋巴(或浆或B淋巴)A、B、AA、BB、ABB、BBA、AA氨基喋呤杂交瘤细胞DNA合成途径有两条,虽然途径①被氨基喋呤阻断,但是途径②可合成DNA,保证杂交瘤细胞的不断分裂增殖
【解析】
单克隆抗体的制备过程:首先用特定抗原注入小鼠体内,小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞,利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,经过三次筛选:①筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞),②筛选能够产生单一抗体的B淋巴细胞,③筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。细胞融合是随机的,可能产生瘤、B、瘤瘤、BB、瘤B等不同类型细胞,在HAT培养基中培养,可筛选出杂交瘤细胞,得到既具有效应B细胞的分泌抗体的特性,又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖特性的杂交瘤细胞。
(1)给小鼠注射的HCG相当于抗原,可诱导小鼠产生能分泌相应抗体的效应B淋巴或浆细胞。
(2)若用A表示骨髓瘤细胞,B表示效应B细胞,加促融剂后,试管中的细胞类型有A、B、AA、BB、AB。由于A细胞可在体外增殖,B细胞无体外增殖的能力,因此在HAT培养液中,B、BB类型细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力,一般10天左右会死亡;氨基喋呤可阻断途径①,故A、AA类型细胞本身缺少DNA合成途径②,途径①也被氨基喋呤阻断,最终也很快死亡。只有AB杂交瘤细胞能在HAT培养基中存活下来,原因是杂交瘤细胞DNA合成途径有两条,虽然途径①被氨基喋呤阻断,但是途径②可合成DNA,保证杂交瘤细胞的不断分裂增殖。