Question

【题目】血红蛋白的提取与分离：

①将洗涤好的红细胞倒入烧杯中，加入蒸馏水和甲苯，其中加入甲苯的目的是___________。

②利用凝胶色谱法分离蛋白质，常选用血红蛋白为材料，其原因是_____________________，该方法的基本原理是根据____________________ （蛋白质特性）而达到蛋白质分离，蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、____________________。

③下图1是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入示意图，正确的加样顺序是____________。如果红色区带__________________，说明色谱柱制作成功。

④一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如下图所示。由图可知携带者有2种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是_____________________

Answer 1

【答案】加速红细胞的破裂并释放出血红蛋白 取材容易，本身有色便于观察 相对分子质量的大小 粗分离、纯化和纯度鉴定 ④①②③ 均匀一致地移动 携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质

【解析】

血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤，②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白溶液。（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

①将洗涤好的红细胞倒入烧杯中，加入蒸馏水和甲苯，其中加入甲苯的目的是加速红细胞的破裂并释放出血红蛋白。

②由于血红蛋白取材容易，本身有色便于观察，常作为利用凝胶色谱法分离蛋白质的材料；凝胶色谱法分离蛋白质的基本原理是根据相对分子质量的大小而达到蛋白质分离，蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。

③据图分析，凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入的正确的顺序是调整缓冲液面、滴加透析样品、样品渗入凝胶床、再调整缓冲液面，即④①②③；如果红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功。

④据图分析可知，携带者有2种血红蛋白，其原因是携带者具有一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质。