题目内容
【题目】糖尿病目前的治疗途径之一是注射胰岛素,胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素 A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题:
(1)根据图1,基因表达载体中没有标注出来的基本结构是____________________。
(2)图1中启动子是________________酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达,氨苄青霉素抗性基因的作用是________________。
(3)人胰岛素由A、B两条肽链组成,可裉据组成肽链的氨基酸序列,确定编码胰岛素基因的碱基序列,再通过________________方法获得目的基因。
(4)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肱链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于________________。
(5)β-半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸,而胰岛素A、B链中不含甲硫氨酸,溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白的目的是____________。
【答案】(1)终止子
(2)RNA聚合 作为标记基因,将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来
(3)人工合成(化学合成)
(4)防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解
(5)获得完整的胰岛素的A链和B链
【解析】(1)基因表达载体的必需组成部分包括启动子、目的基因、标记基因、终止子,图中没有标示终止子 (2)启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位,氨苄青霉素抗性基因是标记基因,作用是将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来 (3)已知组成肽链的氨基酸序列时可以利用人工合成法直接合成DNA (4)β﹣半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,这样可以防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解.(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,由于β﹣半乳糖苷酶中含有多个甲硫氨酸,而胰岛素的A、B链中不含甲硫氨酸,所以用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链,且β﹣半乳糖苷酸被切成多个肽段.