题目内容
【题目】如图为某质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制酶39．如图为某质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。又知植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。已知耐旱基因两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答：
（1）获得耐旱基因常用基因文库法。理论上， 文库中含有该生物的全部基因；而 文库中含有生物的部分基因。
（2）实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是 。酶切产物用DNA连接酶处理后，两两连接的产物有 种。
（3）将上述连接产物导入无任何抗药性的宿主细胞后，将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能正常生长的宿主细胞所含有的连接产物是 。
（4）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是 ，其合成的产物是 。
（5）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱植株与不耐旱植株的数量比为3：1时，则可推测该耐旱基因整合到了 （填“同染色体的一条上”或“同染色体的两条上”）。
【答案】（1）基因组文库 cDNA文库
（2）EcoRⅠ和BamHⅠ 3
（3）载体-载体连接物（或质粒-质粒连接物）
（4）启动子 mRNA
（5）同染色体的一条上
【解析】（1）基因文库包括两种，其中基因组文库含有该生物的全部基因；而cDNA文库文库中含有生物的部分基因。
（2）为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，应该选择EcoRⅠ和BamHⅠ进行切割。酶切产物用DNA连接酶处理后，两两连接的产物有质粒与质粒、质粒与目的基因、目的基因与目的基因3种。
（3）由于目的基因上没有抗四环素的基因，所以将上述连接产物导入无任何抗药性的宿主细胞后，将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能正常生长的宿主细胞所含有的连接产物是载体-载体连接物（或质粒-质粒连接物）。
（4）基因表达载体中，启动子被RNA聚合酶识别后开始转录，形成mRNA。
（5）假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3：1时，该比例符合杂合子（Aa）自交后代的结果，则可推测该耐旱基因（A）整合到了同源染色体的一条上。
口算题卡北京妇女儿童出版社系列答案
