题目内容
【题目】如图是获得转基因抗虫棉的技术流程示意图。
请回答：
（1）A→B利用的技术称为________，其中②过程需要热稳定的_______________酶才能完成。
（2）图中将目的基因导入棉花细胞需要经过③过程，该过程为构建______________，目的是 _________________________。该过程中，要将目的基因插入Ti质粒的__________中。
（3）上述流程示意图中，将目的基因导入棉花细胞所采用的方法是________________法，该方法一般__________(填“适宜”或“不适宜”)用于将目的基因导入单子叶植物。
（4）欲确定抗虫基因是否整合G的染色体DNA上，可以用________________检测。鉴定在G体内是否表达，在个体水平上需要做__________实验。如果抗虫基因导入成功，且与某条染色体的DNA整合起来，该转基因抗虫棉可视为杂合子，将该转基因抗虫棉自交一代，预计后代中抗虫植株占________。
【答案】PCR DNA聚合(Taq) 基因表达载体 使目的基因在受体细胞中稳定存在并可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用 T-DNA 农杆菌转化 不适宜 DNA分子杂交技术 抗虫接种 3/4
【解析】
基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。
（1）A→B利用的技术称为PCR，其中②过程需要热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）才能完成。
（2）图中将目的基因导入棉花细胞需要经过③过程，该过程为构建基因表达载体（重组DNA），其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在且可以遗传给下一代，并能表达。要将目的基因插入Ti质粒的T-DNA中。
（3）上述流程示意图中，将目的基因导入棉花细胞所采用的方法是农杆菌转化法，由于农杆菌对大多数的单子叶植物没有感染作用，所以该方法一般不适宜用于将目的基因导入单子叶植物。
（4）欲确定抗虫基因是否整合G的染色体DNA上，可以用DNA分子杂交的方法进行检测。在个体水平上，可用植株G的叶子喂食虫子，即抗虫性接种实验，观察其抗虫的能力。如果抗虫基因导入成功，且已经整合到宿主细胞一条染色体的DNA上，则该转基因抗虫棉可视为杂合子Gg，将该转基因抗虫棉自交一代，根据基因分离定律，预计后代中抗虫植株G_占3/4。
【题目】科研人员在杂交瘤细胞的基础上，获得了双杂交瘤细胞，能够产生双特异性抗体，该抗体可以同时结合两种抗原。
（1）科研人员将抗原α、β分别注射到小鼠体内，引起机体的__________免疫，__________分泌相应抗体。
（2）科研人员获得上述小鼠的脾脏细胞，制备两种杂交瘤细胞。每种杂交瘤细胞产生的抗体结构、与抗原结合的情况如图1所示。
①制备杂交瘤细胞时，需将上述小鼠的脾脏组织，用__________处理获得单细胞后，再与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞。将两种杂交瘤细胞用__________试剂处理促进其融合，在培养基中加入__________（天然成分）培养。如果两种细胞成功融合，则会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b，这种细胞称作双杂交瘤细胞。
②抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进行组装（A1与B1相同），重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b（a与b相同）。因此，双杂交瘤细胞产生的抗体种类较多，其中有一种抗体能同时与抗原α、β结合称为双特异性抗体，如图2。请将A1、A2、B1、B2、a、b、α、β等字符填入下面的表格中__________。
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
A2 | α |
③为使双杂交瘤细胞只产生图2所示双特异性抗体，降低纯化分离成本，科研人员对重链、轻链的结构进行改造。改造思路是在A、B、a、b的恒定区通过改变__________，进而改变蛋白质的空间结构，实现“榫卯”式互补组装的唯一性，这种改造属于现代生物技术中的__________工程。
（3）结合双特异性抗体特点，请分析其在肿瘤治疗方面的应用前景：________。
