题目内容
【题目】蓝白斑筛选是基因工程中筛选重组目的基因常用的一种方法,表现为培养基上出现蓝白颜色的菌落,可以通过颜色为依据直接筛选重组菌。用于筛选的菌为β-半乳糖苷酶缺陷型菌株,这种宿主菌中编码β-半乳糖苷酶的部分缺失,不具有生物活性。用于蓝白斑筛选的质粒载体一般含有抗性基因和将宿主菌β-半乳糖苷酶缺失部分补全的序列,在这段序列中还含有多个限制性酶切位点,便于插入目的基因。β-半乳糖苷酶能够作用于一种无色化合物X-gal,使其变成蓝色物质。回答下列问题:
(1)玻璃和金属材质的实验器材利用__________方法灭菌。
(2)培养基灭菌后,需要冷却到____℃左右时,才能倒平板。倒平板后,平板冷凝要将平板倒扣,原因是________________。
(3)为防止杂菌污染,培养基中要添加______。蓝白斑筛选能成功,是因为培养基中添加了_________。
(4)最终培养基出现的白色的菌落是(__)
A.目的基因和载体结合 B.只含目的基因 C.只含载体
(5)需要长期保存该菌种,可采用的方法是_______。
【答案】干热灭菌 50 防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染 抗生素 X-gal A 甘油管藏法
【解析】
倒平板的温度一般50℃左右适宜,温度过高会烫手,过低培养基又会凝固;
平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
(1)玻璃和金属材质的实验器材利用干热灭菌方法灭菌。
(2)培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能倒平板。倒平板后,平板冷凝要将平板倒扣,原因是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染。
(3)为防止杂菌污染,培养基中要添加抗生素。β-半乳糖苷酶能够作用于一种无色化合物X-gal,使其变成蓝色物质,蓝白斑筛选能成功,是因为培养基中添加了X-gal。
(4)由于用于蓝白斑筛选的质粒载体一般含有抗性基因和将宿主菌β-半乳糖苷酶缺失部分补全的序列,因此最终培养基出现的白色的菌落是目的基因和载体结合的菌落,故选A。
(5)需要长期保存该菌种,可采用的方法是甘油管藏法。
【题目】为研究细胞内各结构间的关系,科学家用含3H标记的亮氨酸的培养液培养豚鼠的某激素蛋白合成细胞,下表为几种结构中最早检测到放射性的时间表。分析并回答相关问题:
细胞结构 | 附有核糖体的内质网 | 高尔基体 | 靠近细胞膜的囊泡 |
时间/min | 3 | 17 | 18 |
(1)该激素蛋白的多肽在___________内合成。从时间表看,亮氨酸依次经过的细胞结构是______________________________________(请用文字和箭头表示),上述研究方法被称为___________。
(2)高尔基体具有对分泌蛋白进行 ____________的作用。
(3)靠近细胞膜的囊泡来自 ________,最终与细胞膜融合,这体现了生物膜具有 ____________________________性(结构特性)。
(4)该激素蛋白以_______方式分泌,此过程______(需要或不需要)消耗能量。