Question

【题目】为培育矮秆性状的水稻，科研人员进行了下列研究。

（1）科研人员构建含T－DNA的重组质粒，在T－DNA区段中含有已知序列的潮霉素抗性基因。将水稻W的愈伤组织浸入含有上述重组质粒的__________菌液中，20 min后转入水稻愈伤组织培养基培养，3天后转入含__________的培养基中筛选抗性愈伤组织。诱导愈伤组织的材料取自水稻W的未成熟胚，其原因是____________________。

（2）提取转基因水稻W叶片细胞的总DNA，利用T－DNA区段中的__________序列设计引物，用PCR法对转基因水稻进行____________________。

（3）将抗性愈伤组织__________形成的水稻幼苗移栽至大田，得到T0代转基因水稻。以__________为对照，对T0代水稻进行表型分析，筛选得到矮秆突变体G。判断G的矮秆突变性状是否为可遗传变异的常用方法是观察G的自交后代（T1代）____________________。

Answer 1

【答案】 农杆菌 潮霉素 分化程度较低，易于脱分化 潮霉素抗性基因 分子（水平）鉴定 再分化 （非转基因）水稻W 是否出现矮秆性状（或是否发生性状分离）

【解析】试题分析：本题考查基因工程相关知识，通过识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，在结合题意作答。

（1）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。在T-DNA区段中含有已知序列的潮霉素抗性基因，因此用含潮霉素的培养基中筛选抗性愈伤组织。诱导愈伤组织的材料取自水稻W的未成熟胚，其原因是未成熟胚的分化程度较低，易于脱分化。

（2）在T-DNA区段中含有已知序列的潮霉素抗性基因，因此提取转基因水稻W叶片细胞的总DNA后，利用T-DNA区段中的潮霉素抗性基因序列设计引物，再用PCR法对转基因水稻进行分子（水平）鉴定。
（3）愈伤组织经过再分化过程形成幼苗。以（非转基因）水稻W为对照，对T0代水稻进行表型分析，筛选得到矮秆突变体G。判断G的矮秆突变性状是否为可遗传变异的常用方法是观察G的自交后代（T1代）是否发生性状分离。