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(三)回答下列有关生物技术与基因表达的问题

如图所示为利用现代生物技术获得能表达某蛋白酶工程菌的过程及工程菌表达目的基因的模式图。选用的质粒A上有I、II、III、IV四种限制酶切割位点。

1.据图推断过程①获取目的基因时,应选用的限制酶是______________。过程②是利用___________酶将目的基因与运载体连接形成重组质粒。过程③为重组质粒导入受体细胞,如受体细胞为小鼠受精卵,则选用的常规方法是_______________。

2.如同时用酶I和酶IV切割图中质粒A,产生1.8kb和8.2kb的两种片段(1kb=1000对碱基对),如用四种酶同时切割质粒A,则产生0.6kb和8.2kb两种片段,那么用同时用酶II和酶IV切割质粒A,则产生的片段有____________。

3.过程⑤表示______________过程,其需要的原料是_______________。如表列举了是几种氨基酸的密码子。

据此推断图13中合成的多肽,其前三个氨基酸依次是_______________

A. 甲硫氨酸 丙氨酸 丝氨酸 B. 酪氨酸 精氨酸 精氨酸

C. 甲硫氨酸 丝氨酸 丙氨酸 D. 酪氨酸 精氨酸 丙氨酸

4.获得此蛋白酶后,利用酶的固定化技术能回收和重复利用此蛋白酶,以下属于固定化技术中的载体结合法的是_______________

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