Question

【题目】某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

（1）采样与培养：将采集的土样混匀后称取1 g，置于经过_________法灭菌处理的_________（填“固体”或“液体”）培养基中，28 ℃振荡培养。

（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行___ ___处理。之后，将菌液涂布接种于以__________为唯一碳源的固体培养基上，30 ℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈_________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计___________作为空白对照。

（3）筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是__________，则说明此种菌能够___________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用___________法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

Answer 1

【答案】（1）高压蒸汽灭菌 液体

（2）系列稀释（或梯度稀释） 淀粉 倒置 未接种的空白培养基（或“接种等量无菌水的培养基”）

（3）出现透明圈 分泌淀粉酶 平板划线

【解析】（1）培养基一般都用高压蒸汽灭菌法灭菌，因为后面要进行涂布，所以应该用液体培养基来培养。

（2）减小培养液菌体浓度一般用梯度稀释的方法。由于题目要求选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，所以培养基就应只以淀粉为唯一碳源。倒置可以减少培养基受污染，为排除其他因素影响，需要设置未接种的空白的培养基作对照组。

（3）淀粉被水解，培养基会出现透明圈的现象，明此种菌能够分泌淀粉酶使淀粉发生水解。用平板划线法来培养，可进一步纯化菌种。