题目内容

【题目】从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是:采集菌样富集培养纯种分离性能测定。

1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。培养分解纤维素的细菌样应从____________环境采集。

2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,同时抑制或阻止其他微生物生长,使其在群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对纤维素分解菌的富集培养应选择_______________的培养基,此外,在筛选纤维素的分解菌的过程中则是用____________染色法,培养基中出现以纤维素分解菌为中心的_________

3)对分离的菌种还要做进一步的鉴定,如在鉴定分解尿素的细菌时,需在培养基中加入________指示剂,若指示剂变________色,说明有目的菌株存在。

4)从土壤中分离出分解尿素的细菌后,如需计数,在对样品悬液进行梯度稀释时,未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释,用不同稀释倍数的样液接种到平板上进行培养和计数,统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数______(填偏大、偏小或相等)。

5)在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在____________条件下进行,通常将____________的形状、大小、颜色等特征作为鉴定菌种的依据。

6)制作牛肉膏蛋白胨固体培养基时,应待培养基冷却至50℃左右时,在 ________附近倒平板。等待平板冷却凝固后,将平板________

7DNA的鉴定中,DNA________试剂混合经水浴加热呈________色。

【答案】富含纤维素 以纤维素为唯一碳源 刚果红 透明圈 酚红 偏大 无菌 菌落 酒精灯火焰 倒置 二苯胺 蓝色

【解析】

筛选目的菌株一般是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。培养基在配制时,各种成分在溶化后分装前必须进行pH调整,接种前要进行灭菌,保证无菌操作,培养微生物时,应将培养皿倒置。

1)因为不同的微生物生存的环境不同,所以采集纤维素分解菌应从富含纤维素的环境中采集。

2)筛选微生物需配制选择培养基,因为纤维素分解菌能分解纤维素,故在培养基中加入纤维素为唯一碳源。在筛选纤维素分解菌时往往采用刚果红染色法,因为刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—纤维素的复合物就无法合成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,所以我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

3)尿素分解菌能够产生脲酶使尿素分解为氨而使染液pH升高,使得酚红指示剂显红色,所以可以用酚红指示剂鉴定尿素分解菌,证明目的菌株的存在。

4)尿素分解菌的代谢类型是异样需氧型,尿素分解菌主要集中在培养液的上层,所以未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释,用不同稀释倍数的样液接种到平板上进行培养和计数,统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数偏大。

5)微生物的分离和培养过程中,一定要注意无菌操作,防止杂菌污染,通常将菌落的形状、大小、颜色等特征作为鉴定菌种的依据。

(6)制作牛肉膏蛋白胨固体培养基时,待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。待平板冷却凝固约510min后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上。

(7) 在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会变成蓝色。

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