题目内容

【题目】chlL基因是蓝藻拟核DNA上控制叶绿素合成的基因。为了研究该基因对叶绿素合成的控制,需要构建缺失chlL基因的蓝藻细胞。技术路线如下图所示,对此技术的以下描述,正确的是(  )

A. ②过程共形成2个磷酸二酯键

B. ①②过程都需要使用限制酶和DNA连接酶

C. 该项技术操作成功的标志是chlL基因的表达

D. 红霉素抗性基因是标记基因,用于筛选含有 chlL基因的受体细胞

【答案】B

【解析】②过程是将红霉素抗性基因连接到重组质粒1中去,形成4个磷酸二酯键,故A项错误;①过程和②过程需要限制酶切割和DNA连接酶连接,形成重组质粒,B项正确;因最终得到的是无ch1L基因的蓝藻,故操作成功的标志并不是目的基因的表达,C项错误;红霉素抗性基因是标记基因,因为其插入破坏了chlL基因,所以是用于筛选不含有chlL基因的受体细胞,D项错误。

练习册系列答案
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【题目】基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列,图2表示目的基因及限制酶切点,图3表示目的基因上的DNA片段,图4表示质粒.请回答下列问题:

(1)若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA,就其特异性而言,切开的是____________之间相连的化学键.

(2)图3为目的基因中的某一片段,下列有关叙述正确的是_________

A.若图中的ACT能决定一个氨基酸,则ACT可称为一个密码子

B.DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处,解旋酶作用于①处

C.若只用这个片段中的3个碱基对,排列出的DNA片段有64种

D.就游离的磷酸基而言,该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基

(3)若利用PCR技术增加目的基因的数量,由图2可知,A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取_________作为引物(DNA复制子链的延伸方向5′→3′).该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生等长的目的基因片段_________个。

(4)为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选,提高重组效率,应该选择的限制酶是________。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割,假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等,则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有________种。

(5)如果大肠杆菌是受体细胞,则其体内应不含_______ 基因,以利于筛选出含重组质粒的受体菌.目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质,其遗传学基础是_____________________________

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