Question

【题目】如图是利用现代生物工程技术培育转基因抗病香蕉的过程图解，请据图回答：
（1）PstⅠ的识别序列为﹣G↓ACGTC﹣．如果用此酶切割DNA，则形成的能“粘连”起来两段DNA片段为 ．
（2）构建重组Ti质粒时，需要酶和酶参与．将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入．
（3）培养基中的青霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长．若利用该培养基筛选己导入抗病基因的香蕉细胞，应使重组Ti质粒中含有 ， 重组质粒中抗生素抗性基因可作为标记基因，原因是 ．
（4）由导入目的基因的细胞培养成转基因抗病香蕉，采用的是技术．将培育的转基因抗病香蕉进行无性繁殖，在产生的后代中检测各单株的抗病性，结果发现有少数植株表现为不抗病，造成这一结果最可能的原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）
（2）PstI； EcoRI； CaCl2
（3）抗青霉素基因；它能鉴别受体细胞中是否含有目的基因
（4）植物组织培养；抗病基因没有表达
【解析】解：（1）PstⅠ的识别序列为﹣G↓ACGTC﹣，则其切割DNA后形成的能“粘连”起来两段DNA片段为 ．（2）含有目的基因的外源DNA分子上有三种限制酶的识别序列，但SmaⅠ酶的识别序列位于目的基因上，用该酶切割会破坏目的基因，因此构建基因表达载体时，应该选用PstI 酶和EcoRI 酶．将目的基因导入微生物细胞常用感受态转化法，即用CaCl2处理微生物细胞，使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞．（3）培养基中的青霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长．若利用该培养基筛选己导入抗病基因的香蕉细胞，应使重组Ti质粒中含有抗青霉素基因；重组质粒中抗生素抗性基因能鉴别受体细胞中是否含有目的基因，因此可作为标记基因．（4）将转基因植物细胞培育成转基因植株需要采用植物组织培养技术；将培育的转基因抗病香蕉进行无性繁殖，在产生的后代中检测各单株的抗病性，结果发现有少数植株表现为不抗病，造成这一结果最可能的原因是抗病基因没有表达．

所以答案是：（1）如图 （2）PstI EcoRI CaCl2（3）抗青霉素基因 它能鉴别受体细胞中是否含有目的基因（4）植物组织培养 抗病基因没有表达

【考点精析】掌握基因工程的原理及技术是解答本题的根本，需要知道基因工程的原理是利用DNA重组技术．