题目内容
【题目】下图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，请据图回答：
（1）无菌技术是微生物培养和鉴别的关键，在对培养基进行灭菌时，应采用的方法是_____________。为检测培养基灭菌是否彻底，应进行的操作是_________________。
（2）上图中选择培养基应以___________作为唯一氮源；鉴别培养基还需添加_________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成___________色。
（3）若要估算试管中菌种的数量，除了采用显微镜直接计数的方法外，还可采用_______法进行计数，该方法测得的值与实际值相比一般会___________(填“偏大”、“偏小”或“相等”），其原因是________。
【答案】 高压蒸汽灭菌 选取未接种的培养基，放在适宜的条件下培养一段时间，观察有无菌落产生 尿素 酚红 红 稀释涂布平板法 偏小 当两个或多个细菌粘连在一起形成一个菌落
【解析】试题分析：熟记并理解微生物的实验室培养、微生物的分离与计数的相关基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上从题图中提取信息并结合题意作答。
(1)通常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。为检测培养基灭菌是否彻底，需选取未接种的培养基，放在适宜的条件下培养一段时间，观察有无菌落产生。
(2)本实验的目的是从土壤中筛选产脲酶细菌，所以选择培养基应以尿素作为唯一氮源；在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的PH升高，酚红指示剂将变红，因此鉴别培养基还需添加酚红作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成红色。
(3)若要估算试管中菌种的数量，除了采用显微镜直接计数的方法外，还可采用稀释涂布平板法进行计数。由于当两个或多个细菌粘连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以该方法测得的值与实际值相比一般会偏小。
