题目内容
【题目】科研人员从云杉卷叶蛾越冬幼虫中分离出一种超强的抗冻活性基因sbwAFP，并导入番茄植株中，使番茄植株获得抗冻性，下图表示重组质粒的构建和筛选过程。请回答下列问题：（AmpF为氨苄青霉素抗性基因，TetF为四环素抗性基因）
（1）对获得的sbwAFP基因通常用__________技术以扩增数量。分析图示，构建重组质粒时，应选择限制酶__________和______________切割目的基因和质粒。
（2）将重组质粒导入大肠杆菌前，应用_________处理大肠杆菌,以制备感受态细胞，为了筛选将重组质粒，可将大肠杆菌分别在含有四环素和氨苄青霉素的培养基中培养，成功导入重组质粒的大肠杆菌在两种培养基的生长状况为__________________________________。
（3）将成功导入了目的基因的番茄细胞培育成完整植株幼苗所采用的技术是_____________，从细胞的角度分析，所依据的生物学原理是_____________________。
（4）如何从个体水平检测目的基因是否成功表达？__________________________。
【答案】PCR(多聚酶链式反应）Bgl IICla ICa2+在含氨苄青霉素的培养基上能正常生长,在含四环素的培养基上不能正常生长植物组织培养植物细胞的全能性将番茄植株置于冷冻的环境下，观察其是否能正常生长发育
【解析】
（1）扩增目的基因可以用PCR(多聚酶链式反应）技术。根据图示，选择限制酶BglII和 ClaI可以在不破坏目的基因的前提下，将目的基因从供体DNA中切出，并使目的基因能插入四环素抗性基因中。
（2）制备感受态细胞，应用Ca2+ 处理大肠杆菌。重组质粒中，四环素抗性基因被破坏，青霉素抗性基因被保留，成功导入重组质粒的大肠杆菌在含有四环素的培养基上不能生长，在含有氨苄青霉素的培养基可以生长。
（3）成功导入了目的基因的番茄细胞可以通过组织培养技术培育成完整植株幼苗，所依据的生物学原理是植物细胞的全能性。
（4）从个体水平检测目的基因是否成功表达，可以将番茄植株置于冷冻的环境下，观察其是否能正常生长发育。
【题目】某校生物兴趣小组在学习光合作用和细胞呼吸的等知识后，绘制了如下所示物质变化的过程图。该小组成员应用所学知识，探究不同条件对植物光合速率和呼吸速率的影响，利用密闭玻璃容器设计实验，实验结果如下表。请分析并回答问题：
组别 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
温度/℃ | 10 | 10 | 20 | 20 | 30 | 30 | 40 | 40 |
光照强度/lx | 1000 | 0 | 1000 | 0 | 1000 | 0 | 1000 | 0 |
开始时CO2量（单位） | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 | 5.0 |
12h后CO2量（单位） | 4.5 | 5.1 | 3.5 | 5.4 | 1.9 | 5.9 | 2.0 | 5.8 |
(1)图中不应该存在的生理过程是________(填序号），消耗ATP的过程有_______(填序号），过程①发生的场所是________________，表示有氧呼吸过程的有_________________(填序号）。
(2)表中第1、3、5、7各组实验前后C02含量变化值的含义是_________；第2、4、6、8组构成的实验组合，可用于探究________________。
(3)根据表中实验数据可知，较有利于该植物进行光合作用的温度为___℃(填 “20”、“30” 或 “40”）。
【题目】【选修3：现代生物科技专题】
人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示，请回答以下问题：
限制酶 | BamHⅠ | Hae Ⅲ | BclⅠ | Sau3AⅠ | NotⅠ |
识别序列 及切割位点 |
|
|
|
|
|
（1）①过程常采用的方法是_____________________________。
（2）构建基因表达载体时，需要将人乳铁蛋白基因嵌入到启动子和__________________ 之间，这样人乳铁蛋白基因就能在乳腺细胞中表达。
（3）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是___________。
（4）据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含________________ （填“四环素”或“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_____________。
（5）若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为__________________________，对于该部位，这两种酶_____________________（“都不能”或“只有一种能”）切开。