题目内容
【题目】质粒是基因工程中最常用的运载体，质粒上有标记基因，如图所示，通过标记基因可推知外源基因插入的位置，插入位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同。下图表示外源基因的插入位置（插入点有a、b、c）。
Ⅰ.（1）质粒的基本组成单位是___________，在基因工程中作为_________。
（2）将细菌放在含有四环素、氨苄青霉素中培养，属于基因工程操作中的_________步骤。
（3）在插入外源基因过程中用到的工具酶有__________。
Ⅱ.设计实验探究外源基因插入的位置。
（1）步骤：
①将导入外源基因的细菌进行培养产生大量细菌。
②分组：将细菌平均分成两组并标号为1，2。
③培养：将第1组细菌放入含氨苄青霉素的培养基上培养，________________________。
④观察并记录结果。
（2）预测实验结果及结论：
若__________________________，则外源基因插入点是a；
若__________________________，则外源基因插入点是c；
若__________________________，则外源基因插入点是b
【答案】 脱氧核苷酸运载体 目的基因的检测 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 将第2组细菌放入含四环素的培养基中培养 若1组、2组均能正常生长，则外源基因插入点是a 若1组能正常生长，2组不能生长，则外源基因插入点是c 若1组不能生长，2组能生长，则外源基因插入点是b
【解析】试题分析：本题考查基因工程，考查对基因工程操作步骤的理解。解答此题，可根据图中目的基因插入的可能位置判断标记基因是否能正常表达。
Ⅰ.（1）质粒的化学本质为环状DNA，基本组成单位是脱氧核苷酸，在基因工程中作为载体，把目的基因运进受体细胞。
（2）将细菌放在含有四环素、氨苄青霉素中培养，利用抗生素检测目的基因是否转入受体菌，属于基因工程操作中的目的基因的检测步骤。
（3）在插入外源基因时需用限制性核酸内切酶切割质粒，用DNA连接酶连接目的基因和质粒。
Ⅱ.（1）质粒上有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因两个标记基因，检测时可将第1组细菌放入含氨苄青霉素的培养基上培养，将第2组细菌放入含四环素的培养基中培养。
（2）预测实验结果及结论：
若外源基因插入点是a，则两个标记基因均未被破坏，受体菌可抗两种抗生素，1组、2组均能正常生长；
若外源基因插入点是c，则抗四环素基因被破坏，抗氨苄青霉素基因正常，受体菌只能抗氨苄青霉素，不能抗四环素，则1组能正常生长，2组不能生长；
若外源基因插入点是b，则抗氨苄青霉素基因被破坏，抗四环素基因正常，受体菌只能抗四环素，不能抗氨苄青霉素，1组不能生长，2组能生长。
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