Question

【题目】人乳头状瘤病毒（HPV）与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。回答下列问题：

（1）制备抗HPV的单克隆抗体时，给小鼠注入的抗原是__________，然后从小鼠体内获得能产生相应抗体的细胞，这种细胞内参与抗体合成和分泌的细胞器有__________。

（2）制备单克隆抗体过程中用到了小鼠的骨髓瘤细胞，这是因为该细胞具有__________的特点。B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合时，常用的诱导因素有__________等。

（3）在HAT培养基上能够连续增殖的细胞是___________，该细胞所产生的抗体__________（填“一定”或“不一定”）能抗HPV。对HPV抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞进行克隆化培养时，先将培养液中的细胞浓度稀释到3~10个/mL，然后在多孔细胞培养板的每个孔中只能加入0．1 mL细胞稀释液，绝对不能多加，原因是__________。

Answer 1

【答案】HPV或HPV的蛋白质 核糖体、内质网、高尔基体、线粒体 无限增殖 PEG、灭活的病毒、电激 杂交瘤细胞 不一定 使每个孔内的细胞不多于一个，从而达到单克隆培养的目的

【解析】

单克隆抗体制备流程：

（1）对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；

（2）得到相应的B淋巴细胞；

（3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；

（4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）；

（5）对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；

（6）最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体。

（1）制备抗HPV的单克隆抗体时，给小鼠注入的抗原是HPV或HPV的蛋白质。小鼠体内能产生抗体的细胞是浆细胞，抗体属于分泌蛋白，浆细胞中参与抗体合成和分泌的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体和线粒体。

（2）小鼠骨髓瘤细胞具有无限増殖的特点。B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合时常用的诱导因素有PEG、灭活的病毒、电激等。

（3）在HAT培养基上能够连续増殖的细胞是杂交瘤细胞，该细胞所产生的抗体不一定能抗HPV，因为从小鼠体内获得的能产生抗体的浆细胞不只是专门针对HPV的，也有可能是其他抗原刺激后产生的，浆细胞产生的抗体是否是HPV抗体，还需要进行检测。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体，对HPV抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞进行克隆化培养时，先将培养液中的细胞浓度稀释到3～10个/mL，然后在多孔细胞培养板的每个孔中只能加入0.1mL细胞稀释液，绝对不能多加，因为多于0.1mL的细胞稀释液中就可能含2个或更多个细胞，这样每个孔内的细胞就不是一个，就达不到单克隆培养的目的。