Question

【题目】固定化的高温淀粉酶被大规模用于工业生产。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选和固定过程如图1所示。菌株在含有淀粉的固体培养基上可释放淀粉酶分解淀粉，在菌落周围形成透明圈。请分析回答：

(1)与大肠杆菌相比，嗜热菌DNA碱基组成的特点是__。

(2)I号、II号培养基的配制主要包括如下步骤:a.溶化，b.调pH，c.灭菌，d.称量。正确的操作步骤顺序是__。

(3)将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅内，加盖并将排气管插入内层灭菌桶内的排气槽内。拧紧固定盖子的螺栓时，注意__，以免漏气。

(4)Ⅰ号培养基中以淀粉为唯一碳源，从功能上讲该培养基属于__。待菌落长出后，应选择_____的菌落接种到Ⅱ号培养基，第二次及以后的划线，总是从__开始，实验中过程③的目的是__。

(5)若要保证高温淀粉酶的活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则最好选择图2中的__固定化工艺(填图中字母）。

Answer 1

【答案】碱基G和C含量较高，较稳定 d a b c 要同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致 选择培养基 透明圈大 上一次划线的末端 (转移)扩大培养 c

【解析】

1、筛选与分离微生物的接种方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法。
2、培养微生物的培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基，其成分主要有碳源、氮源水和无机盐等。
3、制备培养基的一般步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
4、分析题图：图1是用稀释涂布平板法分离高温淀粉酶的嗜热菌的过程，其中①过程是梯度稀释，Ⅰ号培养基是稀释涂布平板法进行接种的过程，Ⅱ号培养基是平板划线法接种的过程；图2是固定化酶和固定化细胞技术，其中a是物理吸附法，b是化学结合法，c是包埋法。

（1）DNA分子中G和C之间有三个氢键，而A和T之间有两个氢键，DNA分子中氢键越多，结构越稳定。因此与大肠杆菌相比，嗜热菌DNA的碱基G和C含量较高，较稳定。
（2）制备培养基的一般步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，并且在灭菌之前应调PH，因此Ⅰ号、Ⅱ号培养基的配制正确的操作步骤顺序是d称量、a溶化、b调pH、c灭菌。
（3）将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅内，加盖并将排气管插入内层灭菌桶内的排气槽内。拧紧固定盖子的螺栓时，要注意同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，以免漏气。
（4）Ⅰ号培养基中以淀粉为唯一碳源，从功能上讲该培养基属于选择培养基。根据题意，菌株在含有淀粉的固体培养基上可释放淀粉酶分解淀粉，在菌落周围形成透明圈，所以应选择形成透明圈大的菌落接种到Ⅱ号培养基。由于划线后线条末端的目的菌比线条起始处少，故每次从上一次划线的末端开始，能使菌体的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到单个细菌繁殖而来的菌落。故第二次及以后的划线，总是从上次划线的末端开始。实验中过程③的目的是扩大培养。
（5）若要保证高温淀粉酶的活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择包埋法的固定工艺，即图2中的c。