Question

【题目】常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精。请分析回答下列问题：

(1)若要从自然界收集的酵母菌菌株中筛选出能高效利用木糖的菌种，则筛选的基本思路是_______。

(2)将筛选出来的酵母菌放入____ (填“固体”或“液体”)培养基中扩大培养后分成两部分，一部分进行稀释计数，若在3个平板上各接种稀释倍数为104的菌液0.lmL，培养一段时间后平板上的菌落数分别为39、48、54,则每升原样液中酵母菌数为_____；另一部分可用_______________法进行长期保存。

(3)纯化后的酶A可以用电泳法检测其相对分子质量大小。在相同条件下电泳时，带电荷相同的蛋白质_______，说明其分子质量越大。

(4)生产上将酶A固定化以反复利用。部分操作如下:将酶A固定在____________的多孔性载体上，将其装入反应柱内后，需用______充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的酶A。

Answer 1

【答案】将从自然界收集的酵母菌菌株接种到以木糖为唯一碳源的培养基上，在无氧条件下培养一段时间后，取存活下来的酵母菌重复上述过程 液体 4.7×109个 甘油管藏 迁移速度越慢 不溶于水 蒸镏水

【解析】

根据题干信息“常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖”，则常见的酿酒酵母在以木糖为唯一碳源的培养基中死亡；而“自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精”说明这些酵母菌含有相关木糖发酵有关的酶（酶A）的基因。酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差。

（1）根据以上分析已知，某些酵母菌可以分解木糖，可以在以木糖为唯一碳源的培养基上生长，而酿酒酵母不能分解木糖，因此将从自然界收集的酵母菌菌株接种到以木糖为唯一碳源的培养基上，在无氧条件下培养一段时间后，取存活下来的酵母菌重复上述过程，可以获得能高效利用木糖的菌种。

（2）将酵母菌扩大培养应该用液体培养基；根据题干数据分析，已知稀释倍数为104，菌液体积为0.lmL，且三个平板上的菌落数分别是39、48、54，则每升原样液中酵母菌数=（39+48+54）÷3×104÷0.l×1000=4.7×109个；菌种长期保存可以用甘油管藏法。

（3）在相同条件下电泳时，带电荷相同的蛋白质的相对分子质量越大，迁移速度越慢。

（4）利用物理吸附法固定化酶A时，应该将酶A固定在不溶于水的多孔性载体上，将其装入反应柱内后，需用蒸镏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的酶A。