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6.(14分)(2012·惠州模拟)PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,如图表示合成过程,请据图分析回答:

(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述,正确的是________。

A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键

B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键

C.该过程不需要解旋酶的作用

D.该过程与人体细胞的过程完全相同

(2)C过程要用到的酶是________。这种酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以________加入,________(需要/不需要)再添加。PCR反应除提供酶外,还需要满足的基本条件有:________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“94 ℃—55 ℃—72 ℃”温度循环3次,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占________。

(4)如果模板DNA分子共有a个碱基对,其中含有胞嘧啶m个,则该DNA复制10次,需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸________个。

(5)PCR中由碱基错配引起的变异属于________。假设对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,则扩增若干次后检测所用DNA的扩增片段,与原DNA相应片段相同的占________。

答案:(1)C

(2)DNA聚合酶 一次 不需要 DNA模板,分别与两条模板链相结合的两种引物,四种脱氧核苷酸,同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行

(3)

(4)(210-1)(a-m)

(5)基因突变 

解析:(1)高温所起的作用类似于解旋酶,使双链DNA变为单链。

(2)C过程为PCR技术的延伸阶段,当系统温度上升至72 ℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下合成新的DNA链。DNA聚合酶是耐热的,高温下不变性,所以一次性加入即可。

(3)PCR技术遵循半保留复制的特点。经过三次循环,共产生23个DNA分子,其中有2个DNA分子含有15N标记。

(4)在一个双链DNA分子中,C+T占碱基总数的一半,故T的数目为a-m,复制10次,相当于新增加了210-1个DNA分子。故需补充T的数目为(210-1)(a-m)。

(5)基因中的碱基对改变属于基因突变。对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,以后按正常配对方式进行扩增,错配链作模板扩增的都是错误的DNA分子,原正常链扩增得到的DNA分子都是正常的DNA分子,故若干次后检测所用DNA的扩增片段,与原DNA相应片段相同的占1/2。

练习册系列答案
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1.(14分)(2012·郑州三模)请回答下列有关微生物的一些问题。

(1)微生物的分布:微生物主要分布在富含________的土壤表层;不同微生物对pH的要求不同,细菌常生活在酸碱度________的潮湿土壤中。

(2)微生物的消毒和灭菌:在菊花组织培养中,对外植体常用酒精和________进行消毒。在微生物培养中,对培养基常用________方法进行灭菌。对于空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能________。如果要检测灭菌是否彻底,可以采用的方法是:________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)微生物的应用:在葡萄酒的自然发酵过程中,运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精,请写出该过程的化学反应式:____________________。在果醋制作时,运用醋酸菌在________和糖源充足时,将糖分解成醋酸。

(4)微生物的接种:微生物接种的方法很多,最常用的是____________和____________。

(5)微生物的计数:根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出细菌数目往往比实际的数目低,原因是______________。

(6)微生物的鉴定:为检测尿素分解菌的存在与否,在以尿素为唯一氮源的________(选择、鉴别)培养基中加入________指示剂,如果存在尿素分解菌,则指示剂将变________色。

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(1)微生物的分布:微生物主要分布在富含________的土壤表层;不同微生物对pH的要求不同,细菌常生活在酸碱度________的潮湿土壤中。

(2)微生物的消毒和灭菌:在菊花组织培养中,对外植体常用酒精和________进行消毒。在微生物培养中,对培养基常用________方法进行灭菌。对于空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能________。如果要检测灭菌是否彻底,可以采用的方法是:________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)微生物的应用:在葡萄酒的自然发酵过程中,运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精,请写出该过程的化学反应式:____________________。在果醋制作时,运用醋酸菌在________和糖源充足时,将糖分解成醋酸。

(4)微生物的接种:微生物接种的方法很多,最常用的是____________和____________。

(5)微生物的计数:根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出细菌数目往往比实际的数目低,原因是______________。

(6)微生物的鉴定:为检测尿素分解菌的存在与否,在以尿素为唯一氮源的________(选择、鉴别)培养基中加入________指示剂,如果存在尿素分解菌,则指示剂将变________色。

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