题目内容
【题目】滨藜在含盐量0.6%以上的条件下生长,是耐盐碱基因开发的理想材料。若将滨藜的耐盐碱基因转移到水稻等农作物体内,将会大大提高水稻等农作物的种植面积。回答下列问题:
(1)从滨藜中获得耐盐碱基因需要用_____________酶处理,然后与含四环素抗性基因的Ti质粒连接构建___________,并导入农杆菌。在含有四环素的固体培养基中培养,目的是_________________________________________________________。
(2)用农杆菌感染时,应优先选用水稻_________(填“受伤的”或“完好的”)叶片与含重组质粒的农杆菌共同培养,选用这种叶片的理由是__________________________________。
(3)导入耐盐碱基因的植株细胞经过________形成愈伤组织,然后__________形成胚状体,继续发育形成转基因水稻幼苗。
(4)将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液(含盐量0.6%以上)中培养,进行耐盐实验,用非转基因幼苗作为对照。培养30天后观察两者的存活率差异。若_________,则说明转基因植株获得了耐盐特性。
【答案】限制性核酸内切(或限制) 重组质粒(或重组DNA分子) 筛选出导入重组质粒的农杆菌 受伤的 叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质,可吸引农杆菌移向这些细胞 脱分化 再分化 转基因植株存活率高于非转基因植株
【解析】
基因工程的工具酶有限制酶和DNA连接酶,基因工程的操作步骤:一是获取目的基因;二是构建基因表达载体(核心);三是将目的基因导入受体细胞(导入植物细胞一般有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管道法等);四是检测和鉴定目的基因(一是检测目的基因是否导入成功,二是检测目的基因是否成功表达,三是检测目的基因控制的性状是否能在植株上表现出来)。
(1)使用限制酶从滨藜中获得耐盐碱基因,与含抗生素抗性基因的Ti质粒连接构建基因表达载体(或重组质粒),并导入农杆菌,将其在含有四环素的固体培养基中培养,目的是筛选出导入重组质粒的农杆菌。
(2)当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌移向这些细胞,因此用农杆菌感染时,优先选用水稻受伤的叶片。
(3)含有目的基因的植物细胞先脱分化形成愈伤组织,然后再分化形成根、芽和胚状体,然后继续发育形成转基因幼苗。
(4)将生长至4叶期的转基因水稻幼苗转入含盐量0.6%以上的环境中培养,进行实验,用非转基因幼苗作为对照。若转基因植株存活率高于非转基因植株,说明转基因水稻植株获得了耐盐特性。