题目内容
【题目】已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合,加促融剂促进细胞融合,获得杂种细胞,并生产单克隆抗体。请回答下列有关问题:
(1)生产单克隆抗体时,一般不直接利用B淋巴细胞,主要原因是____________________________________________________________________。
(2)①过程中,常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是__________。
(3)②过程为________培养,培养液中还需通入气体物质,其中通入CO2的目的是__________________________________________________________________。
(4)④表示杂交瘤细胞的扩大培养,其既可在体外培养,也可注射到小鼠________内培养,体内培养与体外培养相比,其优点是____________________。
(5)为了从培养液中分离出杂交瘤细胞,需要③过程向培养液中加入_____________,理由是杂交瘤细胞可利用__________________途径合成DNA,从而才能在该培养液中增殖。
【答案】B淋巴细胞不能无限增殖 聚乙二醇 细胞 维持培养液的pH 腹腔 无需再提供营养物质以及无菌环境,操作简便 氨基嘌呤 淋巴细胞中的S
【解析】
1、人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞发生融合后,培养皿中有3中融合细胞(人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞、杂交瘤细胞)和人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞。
2、鼠骨髓瘤细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞中只有D途径,杂交瘤细胞中有D和S两条途径。
(1)生产单克隆抗体时,一般不直接利用B淋巴细胞,主要原因是B淋巴细胞属于高度分化的细胞,不能无限增殖。
(2)植物细胞常采用电刺激、聚乙二醇等手段进行融合,而动物细胞采用电刺激、聚乙二醇、仙台病毒等手段进行融合。因此,①过程中常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是聚乙二醇。
(3)②过程为细胞培养,培养液中还需通入气体物质,其中通入氧气维持细胞呼吸,通入CO2维持培养液的pH。
(4)杂交瘤细胞既可在体外培养,也可注射到小鼠腹腔内培养。体内培养与体外培养相比,其优点是无需再提供营养物质以及无菌环境,操作简便。
(5)人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞在培养皿中混合,加聚乙二醇促进细胞融合,培养液中的细胞有以下5种:人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞、人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞以及杂交瘤细胞。其中,人淋巴细胞、人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞不能无限繁殖,不久会衰老、死亡。向培养液中加入氨基嘌呤,氨基嘌呤可阻断D途径,只有D途径的鼠骨髓瘤细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞无法增殖,而杂交瘤细胞可利用S途径合成DNA,继续繁殖,从而分离出杂交瘤细胞。