题目内容
【题目】我国科学家利用生物工程技术成功地培育出人溶菌酶转基因猪。回答下列问题：
（1）为获取大量的人溶菌酶基因，常用_____________________技术进行扩增，该技术的原理是________________________________。
（2）培育人溶菌酶转基因猪过程中，其核心步骤是___________________________。目的基因进入受体细胞，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为____________。
（3）将受精卵培养至早期胚胎，胚胎的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及___________等物质。体外培养受精卵时，需要提供一定浓度的CO2，其目的是__________________________________。
（4）受精卵经早期胚胎培养后进行胚胎移植，移植到受体子宫中，早期胚胎的_________会形成胎盘和胎膜。也可在移植前对早期胚胎进行胚胎分割而得到两个或多个胚胎，要注意将内细胞团进行均等分割，否则_______________________。
【答案】PCR DNA双链复制 基因表达载体的构建 转化 血清 维持培养液的pH 滋养层 会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育
【解析】
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、动物细胞培养需要满足以下条件：（1）充足的营养供给--微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。（2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。（4）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
（1）为获取大量的目的基因，常用PCR技术进行扩增，该技术的原理是DNA双链复制。
（2）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。目的基因进入受体细胞，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。
（3）胚胎的培养液成分除一些无机盐和有机盐外，还需要维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。体外培养受精卵时，需要提供一定浓度的CO2，其目的是维持培养液的pH。
（4）囊胚的滋养层会形成胎盘和胎膜，内细胞团发育成胎儿各组织器官。胚胎分割要注意将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
