题目内容
【题目】荧光原位杂交可用荧光标记的特异DNA片段为探针,与染色体上对应的DNA片段结合,从而将特定的基因在染色体上定位。请回答下列问题:
(1)DNA荧光探针的制备过程如图1所示,DNA酶I随机切开了核苷酸之间的________键,从而产生切口,以荧光标记的________为原料,在酶X________(DNA聚合酶/DNA连接酶)的作用下,合成荧光标记的DNA探针。酶X的作用是________。
(2)图2表示探针与待测基因结合的原理。先将探针与染色体共同煮沸,使DNA双链中________键断裂,形成单链。随后在降温复性过程中,探针的碱基按照________原则,与染色体上的特定基因序列形成较稳定的杂交分子,图中两条姐妹染色单体中最多可有________条荧光标记的DNA片段。
【答案】磷酸二酯 脱氧核苷酸 DNA聚合酶 将游离的脱氧核苷酸聚合成脱氧核苷酸链 氢 碱基互补配对 4
【解析】
基因探针是用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子作为探针,原理是DNA分子杂交。DNA分子具有独特的双螺旋结构,是由两条平行的脱氧核苷酸长链盘旋而成,外侧由脱氧核糖和磷酸交替连接构成基本骨架,内侧是碱基对(A-T;C-G)通过氢键连接。
(1)根据题意和图示分析可知:DNA酶Ⅰ随机切开了核苷酸之间的磷酸二酯键从而产生切口,形成DNA分子片段,在DNA聚合酶作用下,以荧光标记的四种脱氧核苷酸为原料,合成脱氧核苷酸链。
(2)DNA分子是双链结构,通过氢键连接.将探针与染色体共同煮沸,使DNA双链中氢键断裂,形成单链,随后在降温复性过程中,探针的碱基按照A-T、C-G的碱基互补配对原则,与染色体上的特定基因序列形成较稳定的杂交分子,图中两条姐妹染色单体中含有2个DNA分子共有4条链,所以最多可有4条荧光标记的DNA片段。
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