Question

【题目】下图为将某动物的抗冻蛋白基因导入烟草细胞后培育抗冻烟草的过程示意图。请据图回答下列问题：

(1)对获得的抗冻蛋白基因可通过___________快速扩增其数量，该过程中需要的酶是___________，①过程中需用到的工具酶包括___________。

(2)②过程常采用___________法将抗冻蛋白基因导入烟草细胞，为检测抗冻蛋白基因是否整合到烟草细胞染色体的DNA上，可利用___________制成的探针通过DNA分子杂交进行检测。

(3)③过程中转基因烟草细胞经诱导形成愈伤组织的过程称为___________，然后再发育成完整的幼苗。④过程运用的主要生物技术所依据的生物学原理是___________。

Answer 1

【答案】PCR技术（聚合酶链式反应） 耐高温的DNA聚合酶（Taq酶） 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 农杆菌转化 放射性同位素标记的抗冻蛋白基因的DNA片段 脱分化 植物细胞的全能性

【解析】

据图分析，①表示形成重组质粒，②表示导入受体细胞，③表示脱分化，④表示再分化；构建重组质粒时需要用到核酸内切酶和DNA连接酶，结合鱼的抗冻蛋白基因可知，构建重组质粒时需选用的核酸内切酶是SmaⅠ、PstⅠ，质粒上的ampr为标记基因。

（1）扩增获得的抗冻蛋白基因可通过PCR技术实现，该过程中需要用到Taq酶，①过程中需用到的工具酶包括限制性核酸内切酶和DNA连接酶。

（2）将重组质粒导入到植物细胞中常用农杆菌转化法，故②过程可采用农杆菌转化法将抗冻蛋白基因导入烟草细胞，为检测抗冻蛋白基因是否整合到烟草细胞染色体的DNA上，可利用放射性同位素标记的抗冻蛋白基因的DNA片段制成的探针通过DNA分子杂交进行检测。

（3）③过程中转基因烟草细胞经诱导形成愈伤组织的过程称为脱分化，然后再发育成完整的幼苗，④过程运用的主要生物技术所依据的生物学原理是植物细胞的全能性。