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【题目】研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段。

(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中________(填 “低表达”或“高表达”)。H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建________区基因,转入原核细胞表达并提纯。

(2)将H蛋白注射到小鼠体内,从该小鼠的________获取B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合,使用的不同于植物体细胞杂交的诱导方法是________

(3)将融合细胞在________培养基中培养,一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,进行抗体阳性检测。经多次筛选,就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞,该细胞的特点是_______________________________

(4)将筛选得到的杂交瘤细胞,经过________或小鼠腹腔内培养,获取大量的单克隆抗体。

(5)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”,杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体________________的特点。

【答案】 低表达 胞外 脾脏 灭活的病毒 选择性 既能在体外大量增殖,又能产生抗H蛋白的抗体 体外(培养) 特异性强(或“识别抗原部位专一”)

【解析】(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中低表达,制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,胞外区为识别区,因此应构建胞外区基因,转入原核细胞表达并提纯。

(2)从脾脏获取B淋巴细胞,动物细胞融合特有的方法是灭活的病毒

(3)将融合细胞在选择性培养基中培养,杂交瘤细胞的特点既能在体外大量增殖,又能产生抗H蛋白的抗体

(4)杂交瘤细胞,经过体外或小鼠腹腔内培养,获取大量的单克隆抗体。

(5)单克隆抗体的特点是特异性强

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