题目内容
【题目】正当中国各界激烈争论转基因水稻安全问题之际，在菲律宾首都马尼拉郊外的一片稻田里，一种被称为“金色大米”的转基因水稻已经悄然收获。这种转基因大米可以帮助人们补充每天必需的维生素A。由于含有可以生成维生素A的β一胡萝卜素，它呈现金黄色泽，故称“金色大米”。“金色大米”的培育流程如图所示。请回答下列问题。（已知酶I的识别序列和切点是一G ↓ GATCC一，酶II的识别序列和切点是一↓GATC—）。
（1）图中a、b所示获得目的基因的方法是______________，培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是______________。
（2）据图分析，在构建c的过程中，目的基因用______________（限制酶I或限制酶II）进行了切割。检验重组载体导入能否成功需要利用______________作为标记基因。
（3）过程e运用了细胞工程中的______________技术，该技术的理论依据是______________；在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行______________和______________。
（4）若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含维生素A含量更高、效果更好，则需要通过______________工程手段对合成维生素A的相关目的基因进行设计。
【答案】（1）反转录法（逆转录合成） 基因表达载体的构建
（2）限制酶II 基因I
（3）植物组织培养 细胞全能性 脱分化 再分化
（4）蛋白质
【解析】
试题分析：（1）分析图解：由双链DNA得到单链mRNA的过程应是逆转录过程，说明获得目的基因的方法是反转录法。基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。
（2）据图可知,限制酶Ⅱ的识别序列中包含了限制酶Ⅰ的识别序列,若使用限制酶Ⅰ进行切割,则基因Ⅰ和基因Ⅱ都会被破坏,因此应使用限制酶Ⅱ进行切割。此时基因Ⅰ结构完整,可作为检验重组载体导入能否成功的标记基因。
（3）将目的基因导入植物细胞（过程d）通常采用农杆菌转化法,将受体细胞培育为完整植株需用植物组织培养技术,该技术的理论依据是植物细胞具有全能性；该技术的核心是脱分化和再分化。
（4）对自然界原有基因的修饰、改造需通过蛋白质工程。
