Question

【题目】鲸死亡后会沉入海底，俗称“鲸落”。“鲸落”后期会形成一个以厌氧菌和硫细菌等为主体的生态系统。厌氧菌以“鲸落”肌肉中的脂肪为食，同时产生一些硫化氢等硫化物。硫细菌将硫化物氧化成硫酸盐，并以该过程中释放的能量合成有机物。请回答相关问题：

（1）培养微生物的培养基中一般都会含有水、无机盐、氮源和碳源，培养“鲸落”群落中厌氧菌的碳源必须是______________。要培养硫细菌，培养基中的成分需要特殊配制，主要体现在_________________________，这种培养基可以用来专一性培养硫细菌，所以称为__________________培养基。

（2）在分离“鲸落”中的微生物时要制备固体培养基，在倒平板操作后，将平板倒置，这样做的目的是______

（3）科学家欲研究死鲸的遗传属性，在“鲸落”中提取到了死鲸的DNA,然后可以用________技术对其DNA进行扩增，在扩增死鲸DNA的过程中，除了要加入死鲸的DNA作模板外，还需要加入_________________________（至少答两种）等物质。

（4）为了研究“鲸落”中含有微生物的情况，需将“鲸落”提取物加水稀释，然后将稀释水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，这种方法称为_______________________。下面所示的四种菌落分布情况中，不可能由该方法得到的是___________。

Answer 1

【答案】含碳有机物（或脂肪） 碳源必须是含碳无机物（或碳酸盐），同时加入硫化物 选择 防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染，还可使培养皿表面的水分更好地挥发（防止细菌透过皿低、皿盖的缝隙，落在培养基上） PCR 引物、耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸 稀释涂布平板法 D

【解析】

微生物生长所需要营养成分包括碳源、氮源、水和无机盐等，对于异养微生物，需要添加有机碳源。自养微生物的培养不需要添加含碳有机物。选择培养基是人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度．pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基。微生物接种的方法包括平板划线法和稀释涂布平板法。

（1）厌氧菌以“鲸落”肌肉中的脂肪为食，属于异养微生物，故培养“鲸落”群落中厌氧菌的碳源必须是含碳有机物（或脂肪）。硫细菌将硫化物氧化成硫酸盐，并以该过程中释放的能量合成有机物，即硫细菌为自养生物，所以要培养硫细菌，培养基中的成分需要特殊配制，主要体现在碳源必须是含碳无机物（或碳酸盐），同时加入硫化物。这种人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度．pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基为选择培养基。

（2）在倒平板操作后，将平板倒置，这样做的目的是防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染，还可使培养皿表面的水分更好地挥发（防止细菌透过皿低、皿盖的缝隙，落在培养基上）。

（3）用PCR技术可实现对DNA的体外扩增。PCR扩增的条件为DNA模板、引物、耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸。

（4）使用涂布器涂布的接种微生物的方法为稀释涂布平板法。稀释涂布平板法接种的微生物会在培养基上形成均匀分布的菌落，而平板划线法接种的微生物在划线的起始部分菌落连在一起生长，由图可知，A、B、C均形成了均匀分布的单个菌落，属于稀释涂布平板法接种的，而D中菌落是连在一起生长的，是通过平板划线法接种的，所以D符合题意，ABC不符合题意。

故选D。