题目内容
【题目】图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列，现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG，请回答下列问题：
（1）若用限制酶SmaI完全切割图1中DNA片段，其产物长度为_____________。
（2）若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaI完全切割，产物中共有____种不同DNA片段。为了提高实验成功率，需要通过_________技术扩增目的基因，以获得大量的目的基因。
（3）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是______________。在导入重组质粒后，为了筛选出含质粒的大肠杆菌，一般先用添加_________的培养基进行培养，然后将生长的菌接种到只含____________的培养基中培养，可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞。
（4）假设用BamHI切割DNA获取目的基因，用MboI切割质粒，然后形成重组质粒，若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来，能否用BamHI? _____（能，不能，不一定）。因为目的基因和抗生素B抗性基因拼接处_______________。
【答案】537bp、790bp、661bp 两 PCR BamHⅠ 抗生素B 抗生素A 不一定 不一定出现GGATCC
【解析】
分析题图：外源DNA含有BamHI、MboI、SmaI3种限制性核酸内切酶的识别序列，其中限制酶MspⅠ和SmaⅠ的切割位点在目的基因上。质粒含有MspI、BamHI、MboI3种限制性核酸内切酶的识别序列，其中BamHI酶的切割位点位于抗生素A的抗性基因上；MboI酶的切割位点位于抗生素B和抗生素A的抗性基因上。
（1）图1中DNA片段含有两个SmaⅠ酶切位点，被SmaⅠ酶完全切割后出现三个长度的片段，分别是537bp、790bp、661bp。
（2）D突变成d由于碱基对替换的位置发生在SmaⅠ的位置，所以基因d的序列中含有一个识别位点，经过切割后会产生1327bp和661bp两种长度的片段。为了提高实验成功率，需要通过PCR技术扩增目的基因，以获得大量的目的基因。
（3）限制酶MspⅠ和SmaⅠ的切割位点位于目的基因D上，若用这两种酶切割会被破坏目的基因D；运载体的两个标记基因上都有限制酶MboⅠ的切割位点，用该酶切割会破坏这两个标记基因，因此只能选用限制酶BamHⅠ切割外源DNA分子和运载体；用限制酶BamHⅠ切割质粒会破坏抗生素A抗性基因，但不会破坏抗生素B抗性基因，所以导入重组质粒的大肠杆菌能在含有抗生素B的培养基上生存，因此为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素B的培养基培养；然后将生长的菌接种到只含抗生素A的培养基中培养，可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞。
（4）用BamHⅠ切割DNA获取目的基因，用MboⅠ切割质粒，然后形成重组质粒，用BamHⅠ不一定将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来，因为目的基因和抗生素B抗性基因拼接处含有GATC，不一定出现GGATCC。
【题目】科学家以PLRV（马铃薯卷叶病毒）感染的马铃薯试管苗为实验材料，对不同大小的茎尖超低温处理后，用植物组织培养技术进行再生培养。选取培养18周的20棵植株进行检测并获得病毒保存率，实验结果如下表所示。下列叙述正确的是（ ）
病毒感染类型 | 茎尖大小/（mm） | 病毒保存率/（%） |
PLRV | 0．5 | 0（0/20） |
1．5 | 35（7/20） |
注：括号内数字表示检测阳性样本量/检测总样本量。
A.超低温处理后再生培养时培养基中应加人有机碳源和激素等
B.茎尖脱分化培养获得愈伤组织包裹人工种皮可获得人工种子
C.该技术能克服不同生物远缘杂交不亲和障碍从而培育出新品种
D.1．5mm的茎尖超低温脱毒效果优于0．5mm的茎尖超低温脱毒效果
【题目】哺乳动物成熟红细胞没有细胞核和具膜的细胞器，是研究膜结构功能的常用材料。当成熟红细胞破裂时，仍然保持原本的基本形状和大小，这种结构称为红细胞影，其部分结构如图所示。研究人员用不同的试剂分别处理红细胞影。结果如下表：（“+”表示有，“－”表示无）
实验处理 | 蛋白质种类 | 处理后红细胞影的形状 | |||||
A | B | C | D | E | F | ||
试剂甲处理后 | + | + | + | + | - | - | 变得不规则 |
试剂乙处理后 | - | - | + | + | + | + | 还能保持 |
（1）构成红细胞膜的基本支架是_____________。膜上有多种蛋白质，其中 B蛋白与多糖结合，主要与细胞膜的_______________功能有关。A 和 G 蛋白均与跨膜运输有关，G 主要功能是利用红细胞__________呼吸产生的ATP供能， 通过_______方式排出 Na+吸收 K+，从而维持红细胞内高 K+低 Na+的离子浓度梯度。
（2）在制备细胞膜时，将红细胞置于___________中，使细胞膜破裂释放出内容物。分析细胞膜的组成发现，细胞膜主要是由____________构成。由表中结果推测，对维持红细胞影的形状起重要作用的蛋白质包括_________________。
（3）研究发现，红细胞膜上胆固醇含量与动脉粥样硬化（As）斑块的形成密切相关。成熟红细胞不具有合成脂质的内质网，其细胞膜上的脂类物质可来自血浆。当血浆中胆固醇浓度升高时，会导致更多的胆固醇插入到红细胞膜上，细胞膜_______性降低，变得刚硬易破，红细胞破裂导致胆固醇沉积，加速了 As 斑块的生长。
