题目内容
【题目】借助生物技术，酵母菌在人们生活中发挥了独特的作用，如在造酒业中的应用。请回答下列与醇母菌有关的问题:
（1）制作果酒需要的微生物是酵母菌，在酵母菌的分离与纯化过程中，需将培养棊的pH调至_______性，常采用________法对培养基进行灭菌。果酒配制过程中，若要检测果酒中活体酵母菌的密度，一般采用______法，但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目低。
（2）固定化酵母细胞在啤酒生产中发挥了重要作用，酵母细胞固定化的大致程序为:活化酵母细胞→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。“活化酵母细胞”是指_________。如果海藻酸钠溶液浓度过低，则形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目_____。下面两图是用固定化酵母细胞发酵葡萄糖溶液前、后的示意图，你认为固定化酵母细胞发酵葡萄糖溶液后的是图______，你的判断理由是____________。
【答案】酸 高压蒸汽灭菌 稀释涂布平板 让处于休眠状态的酵母细胞重新恢复正常生活状态 少 乙 固定化的酵母细胞利用溶液中的葡萄糖产生酒精和二氧化碳，结果凝胶珠内包含的二氧化碳气泡使凝胶珠悬浮于溶液上层
【解析】
灭菌一般包括干热灭菌和湿热灭菌，干热灭菌就是指在干燥条件下的灭菌，一般用于玻璃器皿和手术器戒的灭菌；湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，以高温高压水蒸气为介质，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，最终导致微生物的死亡。稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养;在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生 物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。
采用包埋法制备固定酵母细胞的主要步骤酵母细胞的活化(利用蒸馏水使干酵母恢复正常生活状态)→海藻酸钠、CaCl2溶液的配制(在溶解海藻酸钠溶液的过程中使用小火或间断加热，防止溶液焦糊) →海藻酸钠溶液与酵母细胞混合(注意冷却海藻酸钠溶液至室温，防止高温破坏酵母菌的活性) →固定化酵母细胞。
（1）酵母菌属于真菌，培养真菌时需将培养基的pH调至酸性，常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。果酒配制过程中，通过稀释涂布平板法可检测果酒中活体酵母菌的密度，但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目低。
（2） “活化酵母细胞”是指让处于休眠状态的酵母细胞重新恢复正常生活状态。固定化酵母细胞时，如果海藻酸钠溶液浓度过低，则形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目少。由于固定化的酵母细胞利用溶液中的葡萄糖产生酒精和二氧化碳，结果凝胶珠内包含的二氧化碳气泡使凝胶珠悬浮于溶液上层，固定化酵母细胞发酵葡萄糖溶液后的是图乙。
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