题目内容
【题目】糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年上升的趋势。下图是利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图，请据图同答。
（1）过程②必需的酶是__________酶，在生物体内过程③必需的酶是______________酶，在生物体内过程④必需的酶是__________酶。
（2）能否利用人的皮肤细胞来完成①的过程? ______，为什么? ______________。
（3）为使过程⑧更易进行，可用_____________（药剂）处理D。
（4）下列四条DNA分子，彼此间能够粘连起来拼接成新的DNA分子的一组是_______
A．①② B．②③ C．③④ D．②④
（5） 利用过程⑤可在体外大量扩增A，过程⑤的名称是__________技术，原理是___________。应用此技术扩增DNA，需要的条件有：a.引物b. 模板DNAc. 四种脱氧核苷酸d.__________ e.能量 f.Mg2+g.缓冲液
【答案】逆转录 解旋 DNA聚合 不能 皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（未转录），不能形成胰岛素mRNA CaCl2 D PCR DNA双链复制的原理 热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）
【解析】
分析图解可知：图中过程①表示从人体胰岛B细胞中提取mRNA；过程②表示以mRNA为模板，通过逆转录合成DNA的过程；过程③④⑤表示通过PCR技术对目的基因进行扩增，其中③表示高温解链，④表示低温复性，⑤表示中温延伸；过程⑥表示限制酶切割质粒；⑦表示利用DNA连接酶构建重组质粒；⑧表示目的基因导入受体细胞；⑨表示目的基因的检测；⑩为获得基因工程的产物。
（1）过程②表示以mRNA为模板，通过逆转录合成DNA的过程，该过程逆转录酶的催化，过程③为解旋，需要解旋酶的催化，过程④为合成DNA，需要DNA聚合酶；
（2）基因在细胞中是选择性表达的，人的皮肤细胞的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA，因此不能提取到；
（3）过程⑧为目的基因导入受体细胞（大肠杆菌），需要用CaCl2处理，使大肠杆菌处于感受态；
（4）黏性末端在连接的过程中，遵循碱基的互补配对原则，图中看出，只有②④的黏性末端末尾的碱基互补，因此它们彼此间能够粘连起来拼接成新的DNA分子，故选D；
（5）⑤过程是利用PCR技术扩增A，通过该过程可在体外获得大量目的基因，需要用到热稳定（耐高温）的DNA聚合酶，它是利用 DNA双链复制的原理。
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