Question

【题目】下图为利用人成纤维细胞（具分裂能力、能在HAT培养基上存活）和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图，请回答相关问题。

（1）操作所用的成纤维细胞应传代_______________代以内，诱导融合时需要加入的促融剂是_________。

（2）人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成____________细胞，再经过一次____________，形成单核细胞。HAT培养基起____________培养作用，操作中加入乌本苷的目的是____________。

Answer 1

【答案】（1）10 PEG

（2）多核或双核（2分） 有丝分裂 选择 选出杂交瘤细胞（2分）

【解析】（1）成纤维细胞应传代10代以内，遗传物质没有发生改变的细胞株，诱导融合时需要加入的促融剂是PEG（或灭活病毒）．

（2）人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成多核细胞，经过一次有丝分裂，形成单核细胞．据题干信息，人成纤维细胞能在HAT培养基上存活，而小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上存活，则HAT培养基起选择培养作用，筛选出人成纤维细胞和成纤维细胞融合的杂交细胞，操作中加人鸟本苷的目的是除去成纤维细胞，筛选出杂交细胞。