题目内容
【题目】结合下图，回答有关植物转基因和克隆的问题：
（1）Ti质粒携带的目的基因是位于Ti质粒的__________中。愈伤组织细胞是具有__________能力的薄壁细胞。
（2）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，第三步是将目的基因导入受体细胞，图中属于该步的编号是__________，导入方法是__________。
（3）如果目的基因序列已知，常用PCR扩增技术来获取目的基因，该技术中，引物序列的设计是关键。设计引物时，需要避免引物之间发生__________而造成引物失效。为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，常在两条引物上设计加入不同的限制酶识别位点，主要目的是__________。
（4）__________技术常用于植物克隆，图中属于该过程的编号是__________。
【答案】T-DNA 分生（较强的增殖分化） ①② 农杆菌转化法、基因枪法 碱基互补配对 使目的基因定向插入表达载体 植物组织培养 ⑤⑥
【解析】
分析图示，过程①是携带目的基因的农杆菌感染植物，获得含有目的基因的植物细胞，过程②是将含有目的基因的金属颗粒轰击植物细胞，使目的基因整合到受体细胞的染色体上，过程⑤⑥为植物组织培养形成个体的过程。
（1）Ti质粒的T-DNA可转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体的DNA上，所以Ti质粒携带的目的基因是位于Ti质粒的T-DNA中。愈伤组织细胞是具有分生（较强的增殖分化）能力的薄壁细胞。
（2）基因工程的第三步是将目的基因导入受体细胞，根据分析可知，图中属于该步的编号是①②，①的导入方法是农杆菌转化法，②的导入方法为基因枪法。
（3）设计引物时需要避免引物之间碱基互补配对而造成引物自连的现象。为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，常在两条引物上设计加入不同的限制酶识别位点，主要目的是使目的基因能定向插入表达载体，减少自连。
（4）植物组织培养技术常用于植物克隆，图中属于该过程的编号是⑤脱分化和⑥再分化。
