Question

【题目】科研人员利用胚胎干细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗， 其技术流程如图。 请回答：

⑴ 过程①获得重组胚胎之前需要通过______技术获得重组细胞， 接受细胞核的卵母细胞应处于时期， 并用微型吸管吸出______。

⑵ 步骤②中， 重组胚胎培养到囊胚期时， 可从其______分离出 ES 细胞， ES 细胞在形态上表现为细胞核______ 、明显， 在功能上具有______。

⑶ 步骤③中， 需要构建含干扰素基因的______， 构建之前可以利用______技术对目的基因进行扩增。

⑷ 步骤③中将基因导入 ES 细胞的方法通常是______法， 为了检测 ES 细胞的 DNA 上是否插入了干扰素基因， 可采用______技术。 在正常的小鼠体内， 干扰素是在______(填一种细胞器)上合成的。

Answer 1

【答案】 核移植 MⅡ 细胞核 内细胞团 大 核仁 发育的全能性 （基因）表达载体 PCR 显微注射 DNA分子杂交 核糖体

【解析】本题结合图形考查胚胎工程和基因工程，要求考生理解相关知识的要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能利用所学知识解读图形，判断出图中①是细胞核移植、②是早期胚胎培养、③是目的基因导入受体细胞的过程，可据此分析答题。

⑴ 分析图形可知，图中过程①是体细胞核移植，在获得重组胚胎之前需要通过核移植技术获得重组细胞，接受细胞核的卵母细胞应处于MⅡ时期，并用微型吸管吸出细胞核。

⑵ 步骤②是早期胚胎培养， 重组胚胎培养到囊胚期时， 可从其内细胞团分离出ES细胞；ES细胞在形态上表现为细胞核大、核仁明显， 在功能上具有发育的全能性。

⑶ 步骤③是目的基因导入受体细胞的过程， 需要构建含干扰素基因的（基因）表达载体， 构建之前可以利用PCR技术对目的基因进行扩增。

⑷ 步骤③中将基因导入 ES 细胞的方法通常是显微注射法，为了检测ES细胞的DNA上是否插入了干扰素基因， 可采用DNA分子杂交技术，若检测出杂交带，则说明ES细胞的DNA上是否插入了干扰素基因。干扰素的成分是一种含少量糖类的蛋白质，在正常的小鼠体内，干扰素是在核糖体上合成的。