题目内容
【题目】马铃薯块茎含有大量的淀粉，富含多种维生素和无机盐，我国已将马铃薯作为主粮产品进行产业化开发。下图是转基因抗盐马铃薯的培育过程，请分析回答问题：
（1）为获取抗盐基因，可以从碱蓬细胞研磨液中提取抗盐基因的_________来合成cDNA。
（2）上图构建基因表达载体时，最好选用_________酶切割含目的基因的外源DNA和质粒，不能使用Sma l切割的原因是_________________________________。构建好的重组质粒在抗盐基因前要加上特殊的启动子，启动子是一段有特殊结构的_______片段。
（3）将基因表达载体导入农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA上的原因是________。通过农杆菌的转化作用，使抗盐基因插入到马铃薯细胞中的染色体DNA上，从而使抗盐基因的遗传特性得以_________________。
（4）从个体水平上检验转基因抗盐马铃薯是否培育成功的方法是___________________。
【答案】（每空1分，共7分）（1）mRNA
（2）EcoRⅠ和HindⅢ SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 DNA
（3）T-DNA是可以转移的DNA 稳定维持和表达
（4）将转基因马铃薯幼苗栽种在盐碱地或较高浓度盐溶液中，观察是否能正常生长
【解析】（1）基因工程中，获取目的基因时可以利用mRNA为模板，逆转录形成cDNA。
（2）图中质粒的标记基因为抗生素抗性基因，而SmaI的切割位点就在该基因和目的基因上，因此用质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaI切割，则应该用EcoRⅠ和HindⅢ酶切割含目的基因的外源DNA和质粒。基因表达载体中启动子是一段有特殊结构的DNA片段。
（3）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA是可以转移的DNA，可以将目的基因带入马铃薯细胞，并将目的基因插入到马铃薯细胞中的染色体DNA上，从而使抗盐基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
（4）检验转基因抗盐马铃薯是否培育成功，从个体水平上来讲，可以将转基因马铃薯幼苗栽种在盐碱地或较高浓度盐溶液中，观察是否能正常生长。
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