题目内容
【题目】如图表示基因工程中获取目的基因的示意图,不正确的是( )
A.①过程需要逆转录酶
B.②过程用到的限制性核酸内切酶在从基因组文库中获取目的基因时也要用到
C.③表示 PCR 技术,用来扩增目的基因
D.若获取的目的基因相同,则图中基因组文库小于 cDNA 文库
【答案】D
【解析】
基因文库包括基因组文库和部分基因文库(如cDNA文库)。将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。如果这个文库包含了某种生物的所有基因,那么,这种基因文库叫做基因组文库。如果这个文库只包含了某种生物的一部分基因,这种基因文库叫做部分基因文库,例如cDNA文库,首先得到mRNA,再反转录得cDNA,形成文库。cDNA文库与基因组文库的区别在于cDNA文库在mRNA拼接过程中已经除去了内含子等成分,便于DNA重组时直接使用。
A、①过程是RNA逆转录形成DNA的过程,需要逆转录酶,A正确;
B、②过程将DNA切割成不同大小的片段,用到的限制性核酸内切酶在从基因组文库中获取目的基因时也要用到,B正确;
C、③表示 以DNA为模板进行的PCR 技术,用来扩增目的基因,C正确;
D、若获取的目的基因相同,则图中基因组文库大于 cDNA 文库,D错误。
故选D。
【题目】急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)患者的胰腺组织,由于自身消化、水肿、出血甚至会坏死,所以具有很高的致病率与致死率。以往研究成果发现细胞自噬是引起急性胰腺炎的主要原因。在前期实验中发现AP的细胞中MasⅠ基因表达量异常,故推测该基因表达量的变化可能对AP细胞自噬有影响。为证明这一推测,科研人员做了如下实验。请据此回答:
(1)取小鼠胰腺的组织,剪碎、并用_____处理,使细胞分散以便进行_____代培养。与植物组织培养相比,培养动物细胞的培养基中不需要添加_________等物质,这样可以模拟动物细胞在体内的环境。
(2)已知雨蛙素(CAE)可以诱导细胞自噬。一些小分子RNA(siRNA)可以特异性的降解同源mRNA,从而抑制特定基因的表达。通过DNA重组技术导入特定的基因可以使细胞中该的基因表达量提高。下表显示了部分实验处理方法,“+”表示施加处理,“-”表示不施加处理,请在①②③后面的横线处填“+”或“-”,以完善实验方案:
处理方法 | A 组 | B组 | C组 | D组 |
加入雨蛙素 | - | + | ① | + |
导入 MasⅠ-siRNA | - | - | + | ② |
导入 MasⅠ基因 | - | - | ③ | + |
处理①_____;处理②________;处理③_____。
(3)细胞中的LC3蛋白表达量同细胞自噬程度呈正相关,可以使用_____法检测细胞中LC3的表达量,用以反映细胞自噬的情况。实验结果如图所示:
注:图中红色荧光的分布范围和亮度与LC3蛋白的表达量呈正相关
分析实验结果可知,与MasⅠ基因低表达组相比,高表达组细胞自噬现象_____。由此提示,若能_________________________________________,则有利于保护AP细胞。