题目内容
用限制酶E将长度为5.0kbp（千碱基对）质粒的一处切断；接着，用限制酶E获得含1.5kbp的目的基因；再用DNA连接酶连接成为重组质粒，扩增。现用限制酶B、E、H（组合）对克隆的重组质粒进行切割，电泳分离的结果如下图。则用限制酶B和限制酶H共同完全切割一个重组质粒，预计产生的断片长度（kbp）是
①2.0、3.0、1.0和0.5 ②2.0、3.0、0.5、0.5和0.5
③3.0和3.5 ④2.5和4.0
- A.①或②
- B.①或③
- C.③和④
- D.③或④
D
本题考查知识点为限制酶的特异性。由题干和图表可知限制酶E切割重组质粒后会得到2个片段分别为5.0和1.5kbp长度的DNA，限制酶B和E混合后，所得DNA片段共有3.0、2.0和1.5kbp三段，说明限制酶B作用位点在5.0kbp的质粒中，限制酶H和E混合后，所得DNA片段共有5.0、1.0和0.5kbp三段，说明限制酶B作用位点在1.5kbp的目的基因中，因此将二者混合后可得到的DNA片段为4和2.5kbp或者3.5和3kbp，答案为D。
本题考查知识点为限制酶的特异性。由题干和图表可知限制酶E切割重组质粒后会得到2个片段分别为5.0和1.5kbp长度的DNA，限制酶B和E混合后，所得DNA片段共有3.0、2.0和1.5kbp三段，说明限制酶B作用位点在5.0kbp的质粒中，限制酶H和E混合后，所得DNA片段共有5.0、1.0和0.5kbp三段，说明限制酶B作用位点在1.5kbp的目的基因中，因此将二者混合后可得到的DNA片段为4和2.5kbp或者3.5和3kbp，答案为D。
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