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【题目】新南威尔士大学的研究人员破解了胎儿血红蛋白的“消失之谜”,掌握了重启它的基因钥匙,胎儿血红蛋白可以弥补成人血红蛋白的缺失,那些成人血红蛋白有缺陷的,比如镰刀状细胞贫血症患者,或许将迎来新的治疗希望。研究人员准备从胎儿血液中提取和分离血红蛋白,据图回答下列问题。

1)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,加入柠檬酸钠的目的是__________

2)图1装置中C溶液是__________;用图1装置分离蛋白质的方法叫__________

3)在检测的样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图2所示。

①将样品装入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋内,则分子__________也保留在袋内,其原因是__________

②用图1装置分离样品中的蛋白质,则移动速度最慢的分子是__________;若将样品进行SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳其结果如图3所示,移动速度最慢的分子对应图中__________带(填“M”、“N”或“P”),判断理由是______________________________

【答案】防止血液凝固 磷酸缓冲溶液 凝胶色谱法 丙和丁 透析袋是半透膜制作的,小分子物质可以通过,大分子物质不能通过,丙和丁分子都比乙大,所以也保留在袋内 P 移动速度最慢的分子甲其相对分子质量最小,又因其带负电荷,在电泳中的移动速度最快,则对应P

【解析】

血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有:

1)样品处理:①红细胞的洗涤(低速短时间离心),②血红蛋白的释放(需要加入蒸馏水和甲苯),③分离血红蛋白(中速长时间离心)。

2)粗分离:①分离血红蛋白溶液,②透析。

3)纯化:调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。

4)纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

1)在采血容器中预先加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。

2)用图1装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法,分子量大的,流动快。其中装置中C溶液是磷酸缓冲溶液;

3)①分析图乙可知,透析袋是半透膜制作的,小分子物质可以通过,大分子物质不能通过,丙和丁分子都比乙大,若分子乙保留在袋内,则分子丙、丁也保留在袋内。

②图1装置是根据相对分子质量的大小分离样品中的蛋白质,分子量大的,流动快,据图2分析可知,甲的分子量最小,最容易进入凝胶内部的通道,路程最长,移动的速度最慢;若将样品进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳其结果如图3所示,移动速度最慢的分子甲相对分子质量最小,又因其带负电荷,在电泳中的移动速度最快,则对应P带。

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