题目内容
【题目】中国女科学家屠呦呦因青蒿素研发所做的重大贡献，荣获2015年诺贝尔生理医学奖。下图是青蒿细胞产生青蒿素，以及酵母细胞产生固醇的合成途径。
请回答：
（1）基因工程的核心步骤是__________________。采用基因工程培育能生产青蒿素的酵母细胞，应将控制合成__________的基因导入酵母细胞，从酵母细胞中提取蛋白质，采用____________________方法检测，若有__________出现，表明目的基因已表达。
（2）转基因酵母细胞合成的青蒿素很少，可通过抑制__________的活性，以减少__________合成，提高青蒿素产量。
（3）生产上大量培养转基因的酵母细胞，应提供的条件是____________________。（至少写三点）
【答案】 基因表达载体的构建 ADS酶的基因和CPY71AV1酶 抗原-抗体杂交 杂交带 FRG9酶 固醇 充足的氧气、充足的营养、适宜的温度和pH、无菌无毒
【解析】试题分析：本题考查基因工程、细胞工程，考查对基因工程操作步骤、细胞培养条件的理解，解答此题，可根据图中酵母细胞和青蒿细胞代谢途径的异同判断培育能生产青蒿素的酵母细胞的思路。
（1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。据图可知，青蒿细胞和酵母细胞均可以形成FPP，青蒿细胞含有特有的ADS酶和CPY71AV1酶，采用基因工程培育能生产青蒿素的酵母细胞，应将控制合成ADS酶的基因和CPY71AV1酶的基因导入酵母细胞。分子水平上检测转基因是否成功，可从酵母细胞中提取蛋白质，采用抗原-抗体杂交方法检测，若出现抗原-抗体杂交带，表明目的基因已成功表达。
（2）转基因酵母细胞可把FPP转化为固醇，导致转基因酵母细胞合成的青蒿素很少，可通过抑制合成固醇所学的FRG9酶的活性，以减少固醇合成，提高青蒿素产量。
（3）酵母菌属于兼性厌氧性细胞，在有氧条件下可快速繁殖，大量培养转基因的酵母细胞，应提供充足的氧气、充足的营养、适宜的温度和pH、无菌无毒等环境。
