题目内容

10．GDNF是一种神经营养因子．对损伤的神经细胞具有营养和保护作用．研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究．请回答：

（1）在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是使细胞分散开．
（2）构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的限制酶XhoⅠ进行酶切．
（3）经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）．为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示．图中第②泳道显示所鉴定的1载体是正向连接的．
（4）将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的与提取的蛋白质杂交．当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行培养以得到更多数量的传代细胞，用于神经干细胞移植治疗实验．

分析 1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．

解答 解：（1）动物细胞培养时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶作用，使细胞分散开．
（2）质粒上有XhoⅠ识别位点，而且在启动子之后，所以选用XhoⅠ限制酶进行酶切．
（3）泳道①仅有一种条带，属于载体自连；泳道②有两种条带，且长度分别与质粒和GDNF基因长度相同，为正向连接；泳道③有两种条带，长度与BamHⅠ酶切后结果相同，为反向连接．
（4）检测基因是否表达采用抗原抗体杂交法．培养动物细胞采用动物细胞培养法，当细胞密度达到一定程度，需要进行分瓶，进行传代培养．
故答案为：
（1）使细胞分散开
（2）XhoⅠ
（3）②
（4）抗体   传代

点评 本题考查基因工程、动物细胞培养的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤等，掌握各步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确判断各选项．

练习册系列答案
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8．如图为某湿地公园的平面图（阴影部分表示公园）．

（1）调查发现该湿地公园主要河道沿途有许多生活污水的排污口（图中黑点所示），则输入该湿地生态系统的能量有（生产者固定的）太阳能和（污水有机物中的）化学能，迸一步调查发现，在轻度污染的条件下，公园中的物种丰富度有所增加，在此过程中，公园中群落演替的类型是次生演替．
（2）某研究小组从该湿地公园的四个不同地方选取水样，用于培养菖蒲（公园中的一种湿地植物），并测定了实验前后4处水样（分别标号为A、B、C、D）中的相关数据，整理后如图所示（BOD表示水中有机物经微生物分解所需要的氧气量）：

①实验中的变量除BOD外，还有含氮无机盐总量．
②推测有机物污染严重的是B水样．
③实验后4处水样中的含氮无机盐总量均下降到较低水平，其原因可能是（含氮无机盐）被菖蒲吸收．
④若需实地研究该湿地公园的污水处理能力，应分别对进水口（或“排污口”）和出水口（或“河道出水口”） 的水质进行监测和分析．
（3）生态学家提醒：决不能因为该湿地公园具有污水处理能力而向公园大量排放污水，否则必将导致该湿地生态系统的破坏，这是因为生态系统的自我调节能力是有一定限度的．
9．试回答下列有关群落的问题：
（1）研究生物群落要以研究种群为基础，在研究池塘群落时，主要研究该群落内种群数量（即群落的丰富度）、各种群之间的关系、群落演潜情况等方面的内容．
（2）在群落中，各个生物种群分别占据了不同的空间，使群落具有一定的空间结构，群落的空间结构包括水平结构和垂直结构．
（3）研究表明森林植物群落具有明显的分层现象，森林植物的分层与对光的利用（光照强度）有关．而植物的垂直结构又为动物创造了多样的栖息空间和食物条件，导致群落中的动物也具有分层现象．
6．在一定实验条件下，测得某植物光合作用速率与光照强度之间的关系及光合作用速率和呼吸速率与温度之间的关系如图所示，请据图回答下列问题：

（1）影响图甲中a曲线A点上下移动的外界因素主要是温度，C点时每小时合成的葡萄糖的量为30克；图乙中细胞呼吸有关曲线的数据需在无光（或黑暗）条件下测量．
（2）由图可知，40℃时，植物体不能（填“能”或“不能”）显示生长现象；而5℃时的状态可用图甲中B（填“A、B”或“C”）点表示．
（3）用大棚种植蔬菜时，白天应控制光强为C点对应的光照强度，温度为25℃最佳．
（4）请在乙图中画出该植物的净产量（CO2吸收量）随温度变化的曲线图．
（5）如果用如图丙所示的装置来探究光照强度和光合作用速率的关系，且测量指标为装置中O2含量的变化，则该装置需要进行适当修改，具体修改措施是将小烧杯中的蒸馏水换成CO2缓冲液或碳酸氢钠溶液，修改后该装置测定的数据表示该实验条件下光合作用的净产量（氧气释放量）；为使测得O2的变化量更精确，还应再设量对照装置，该装置的容器和小烧杯中应分别放入死的植物幼苗和CO2缓冲液．
5．下列关于生态系统的功能的描述，正确的是（　　）
A．碳循环即指生态系统中的物质循环，具有全球性特点
B．在食物链上的生物间信息传递可以双向进行而能量流动只能单向进行
C．分解者分解动植物遗体产生的物质和能量可以被植物利用
D．防治稻田害虫，能提高生产者和初级消费者之间的能量传递效率
15．如图是细胞内几种有机物及其功能的关系图，m1、m2、m3、m4分别是有机物M1、M2、M3、M4的组成成分．下列说法正确的有几项（　　）
①相同质量的M1和M2被彻底氧化分解，则M1的耗氧量多
②M3具有物质运输、催化、调节、免疫等多种功能
③m3和m4之间的区别主要是五碳糖和碱基的种类不同
④在SARS体内，将M4彻底水解，得到5种碱基，2种五碳糖．
A．零项B．一项C．两项D．三项
2．如图表示细胞内某些有机物的元素组成和功能关系，其中A、B代表元素，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ是生物大分子，图中
（1）使用双缩脲试剂鉴定Ⅳ时，应先加0.1g/mlNaOH1mL，再加入0.01g/mlCuSO44滴（填物质及浓度）．
（2）Ⅱ具有多样性的原因主要是脱氧核苷酸的数量、脱氧核苷酸的排列顺序．
（3）由小分子物质X、Y、Z、P生成大分子物质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的过程中，有一共同的生成物是水．
（4）染色体的主要成分是Ⅱ和Ⅳ．（填序号）
（5）物质V与Ⅰ相比，所含元素中含量更多．除了储能外，还具有保温、缓冲和减压作用．
19．如图是人体某组织的各种液体示意图，请根据图回答下面的问题．

（1）指出图中字母所示名称：b表示组织液；c表示血浆．
（2）以上b、c、d合称细胞外液（内环境），写出它们之间的关系式．
（3）毛细血管壁细胞的具体内环境是组织液和血浆．b、c相比，蛋白质含量较高的是C．
（4）若某人长期营养不良，血浆中蛋白质降低，会引起图中哪一部分的液体增多？[b]组织液，
（5）目前普遍认为，维持内环境稳态的主要调节机制是神经-体液-免疫．
20．如图分别是植物细胞、动物细胞、细菌、蓝藻细胞的模式图，根据图示判断下列说法正确的是（　　）
A．①③都能进行光合作用，体现了细胞的统一性
B．不同生物细胞的大小、形态、结构是多种多样的，体现了细胞的多样性与统一性
C．四种细胞的遗传物质都是 DNA，都有多种细胞器，体现了真核细胞和原核细胞的统一性
D．①②都有细胞核，体现了真核细胞的统一性，③④都没有细胞核，只有拟核，也体现了原核细胞的统一性

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