Question

【题目】乳酸菌和我们的生活紧密相连，现欲从泡菜滤液中分离乳酸菌。请回答下列相关问题。

（1）要纯化培养乳酸菌，在配制固体培养基时，除了要加入各种营养物质外，一般还要加入琼脂。培养基中的(NH4)2CO3____________（能/不能）为乳酸菌提供碳源 ，原因是___________________________。

（2）纯化培养乳酸菌时，可采用_____法进行接种。为了能鉴别乳酸菌菌落，往往在配制培养基时加入碳酸钙，原因是_____。

（3）甲、乙同学测定泡菜滤液中微生物的浓度。在对应稀释倍数为105的培养基中，得到以下两种统计结果：乙同学在该浓度下涂布了平板，统计的菌落数为49；丙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为43、54、287，然后取其平均值128作为统计结果。 请评价这两位同学的实验结果的有效性。

①乙同学的结果_____，原因是_____。

②丙同学的结果_____，原因是_____。

（4）丁同学采用血细胞计数板计数(规格为16×25，16个中方格，每个中方格有25个小方格，体积为0.1mm3)，统计4个中格中的细菌数，计算出每个小格所含细菌的平均数为3个， 则每毫升样品中的细菌数是(稀释倍数为104)_____个。

Answer 1

【答案】不能 乳酸菌为异养生物只能利用含碳有机物 平板划线法或稀释涂布平板法 乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈 无效 没有设置重复实验，结果不具有说服力 无效 一个平板上的菌落计数结果与另外两个相差太大 1.2×1011

【解析】

制作泡菜时需要用到乳酸菌，乳酸菌是一种厌氧菌，在无氧条件下，乳酸菌发酵产生乳酸，使得泡菜呈现特殊的风味。乳酸菌的代谢类型为异养厌氧性，因此培养乳酸菌时需要提供有机碳源并且隔绝氧气；乳酸菌经过发酵可产生乳酸，乳酸会与碳酸钙反应而使加入碳酸钙的培养基出现透明圈反应。

（1）由于乳酸菌为异养生物，只能利用含碳有机物，因此培养基中的(NH4)2CO3不能为乳酸菌提供碳源。

（2）纯化培养乳酸菌时，可采用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种。由于乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈，因此为了能鉴别乳酸菌菌落，往往在配制培养基时加入碳酸钙。

（3）①甲同学的实验结果是无效的，因为其只涂布了一个平板，没有设置重复实验，结果不具有说服力。

②乙同学的实验结果也是无效的，因一个平板上的菌落计数结果与另外两个相差太大，不能简单的用其平均数。

（4）根据题干提供的数据进行计算，每毫升样品中的细菌数(稀释倍数为104)=3×16×25÷0.1×1000×104=1.2×1011。