Question

【题目】下表是某同学列出的分离土壤中微生物培养基的配方数据表,据此回答下列问题：

（1）培养微生物的培养基中,一般都含有碳源、氮源、____等营养物质。若用于培养乳酸菌，培养基中除上述营养物质外,还需要添加______。细菌能利用尿素作为氮源，是由于其能合成______酶。

（2）在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时,还需在培养基中加入____指示剂。接种前一般采取_____对培养基进行灭菌。

（3）某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为105的土壤样液0.1mL,培养后菌落数分别为161、155、158、170个,则每毫升原土壤样液中尿素分解菌的数量为_______。某同学在纯化土壤中的尿素分解菌时,培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是________。

（4）常采用______法将纯化得到的目的菌长期保存。

Answer 1

【答案】 水和无机盐 维生素 脲 酚红 高压蒸汽法 1.61×109 菌液浓度过高(土壤溶液稀释不够） 甘油管藏

【解析】【试题分析】

本题考查微生物的培养、分解尿素的细菌的分离和计数等相关知识，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。解答本题需掌握：

1、培养微生物时，培养基中需要加入碳源、氮源、无机盐、水，还需要满足微生物生长对pH，特殊营养物质以及氧气的要求，如培养乳酸菌需要加入维生素，培养霉菌需要把pH值调到酸性等。

2、能够分解利用尿素的细菌，其细胞内含有脲酶，可以把尿素分解成氨，提供N源，进一步利用，只含有尿素作为N源的培养基对微生物具有选择作用。以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可以选择和鉴别尿素分解菌。

（1）培养微生物时，培养基中一般都需要加入碳源、氮源、无机盐和水等营养物质；若用于培养乳酸菌，培养基中除上述营养物质外,还需要添加维生素；细菌能合成脲酶，所以能利用尿素作为氮源。

（2）对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，说明有目的菌株存在；接种前一般采取高压蒸汽法对培养基进行灭菌。

（3）1毫升原土壤样液中上述微生物数量＝（161+155+158+170）÷4÷0.1×106＝1.61×109个；在纯化土壤中的尿素分解菌时,培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是菌液浓度过高(土壤溶液稀释不够）。

（4）常采用甘油管藏法将纯化得到的目的菌长期保存。