Question

14．临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验．实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性．
回答下列问题：
（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用平板划线法或稀释涂布平板法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得．
（2）取该单菌落适当稀释，用稀释涂布平板法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板．
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B不敏感；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明该致病菌对C的敏感性较A的弱；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的耐药菌．
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素A．

Answer 1

分析 （1）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．
（2）根据材料分析，透明圈的出现，说明该菌不能生长．

解答 解：（1）分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法．
（2）取该单菌落适当稀释，使其“均匀生长”的方法是用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养．
（3）在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌；透明圈的大小表示着此种抗生素抗菌的强弱．据此可判断抗菌强弱依次是A、C、B；D的透明圈中出现了一个菌落，说明该菌落对此种抗生素具有耐药性．
（4）根据（3）的分析，实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好．
故答案为：
（1）平板划线法 稀释涂布平板法
（2）稀释涂布平板法
（3）敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性较A的弱 耐药菌
（4）A

点评 本题的知识点是微生物培养过程中的接种方法，以及分析实验结果获取结论的能力和，利用所学的微生物知识解决生活问题的能力，解决问题的关键是运用所学过的知识点“透明圈”，进行知识点的迁移、类比，然后解决问题．