题目内容
【题目】蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值。某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株，做了如下实验步骤(配制了下列培养基，在适宜条件下培养)：
(1)为实现筛选目的，步骤Ⅰ所使用的培养基配方中，应去除______并加入高浓度的____________。该培养基从功能上看属于_______培养基。
(2)灭菌是否彻底或是否被污染需要检测，检测方法是__________。
(3)为实现目的菌的分离和计数，步骤Ⅱ所使用的培养基中还应加入____制成平板，采用的接种方法是_____________。
【答案】葡萄糖蛋白质选择未接种的培养基在适宜条件下放置一段时间后，观察培养基上是否有菌落产生琼脂稀释涂布平板法
【解析】
本题考查微生物的培养、分离，考查对培养基成分、功能、微生物分离、计数方法的理解。分离微生物，可利用选择培养基，在固体培养表面根据菌落特征对微生物进行分离、计数。
(1)产蛋白酶的高产菌株可以蛋白质为碳源，筛选目的菌，步骤Ⅰ所使用的培养基配方中，应去除葡萄糖，并加入高浓度的蛋白质。该培养基上以葡萄糖为碳源的微生物难以生长，从功能上看属于选择培养基。
(2)检测灭菌是否彻底或是否被污染，可把未接种的培养基在适宜条件下放置一段时间后，观察培养基上是否有菌落产生。若没有菌落产生，说明灭菌彻底且未被污染。
(3)进行目的菌的分离和计数，应使用固体培养基，步骤Ⅱ所使用的培养基中应加入琼脂制成平板，平板划线法只能分离微生物，不能对微生物进行计数，应采用稀释涂布平板法进行分离、计数。
比较项目 | 平板划线法 | 稀释涂布平板法 |
关键操作 | 接种环在固体平板培养基表面连续划线 | ①一系列的梯度稀释②涂布平板法操作 |
注意事项 | 每次划线前后均需灼烧接种环 | 稀释度要足够高，为确保实验成功可以增加稀释度的范围 |
菌体获取 | 在具有显著菌落特征的区域的菌落中挑取菌体 | 从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体 |
优点 | 可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落 | 既可以获得单细胞菌落，又能对微生物进行计数 |
缺点 | 不能对微生物计数 | 操作复杂，需要涂布多个平板 |
