题目内容
【题目】为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图：(ampr表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达)
请回答：
(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，________(填“需要”或“不需要”)启动子。
(2)步骤②中，用Ca2＋处理大肠杆菌，使之成为______细胞，然后导入重组载体。实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有______基因。
(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和Xgal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。根据上述原理可以初步判断________(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。
(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与____________________形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。
【答案】 需要 感受态 Amp(或氨苄青霉素抗性或抗性） 白色 SHH转录的mRNA (只写mRNA不对）
【解析】试题分析：图示是检测SHHH基因在角化囊肿中表达情况的流程，其中①为基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶；②是将目的基因导入受体细胞的过程；③表示用含有氨苄青霉素的选择培养基进行筛选；④表示用探针进行检测。
（1）由图可知，SHH基因插入在LacZ基因中，LacZ基因被SHH基因插入后不表达，所以要使SHH基因表达就需要启动子，启动子是RNA聚合酶识别结合的位置，RNA聚合酶结合到启动子才能转录。
（2）大肠杆菌细胞用Ca2+处理后就称为感受态细胞；要在添加氨苄青霉素的培养基上生存，一定要含有抗氨苄青霉素基因才可以，没有抗氨苄青霉素基因将会死亡。
（3）能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X－gal的培养基上会形成蓝色菌落，重组菌中LacZ基因被SHH基因插入后不表达，含有IPTG和X－gal的培养基上会形成白色菌落。
（4）判断SHH基因的转录情况，也就是判断SHH基因是否转录出mRNA。
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