ÌâÄ¿ÄÚÈÝ
£¨6·Ö£©Çë»Ø´ðPCR·½ÃæµÄÓйØÎÊÌ⣺
(1)ÒýÎïÊÇÀ©Ôö¹ý³ÌÖбØÐë¼ÓÈëµÄÎïÖÊ£¬´Ó»¯Ñ§±¾ÖÊÉÏ˵£¬ÒýÎïÊÇһС¶Î_______________¡£
(2)ÒýÎïÊÇ×ÓÁ´ºÏ³ÉÑÓÉìµÄ»ù´¡£¬ÈçÏÂͼ¡£
![]()
´ÓÀíÂÛÉÏÍÆ²â¡£µÚËÄÂÖÑ»·²úÎïÖÐÁ½ÌõÍÑÑõºËÜÕËáÁ´µÈ³¤µÄDNAƬ¶ÎËùÕ¼DNA×ÜÊýµÄ±ÈÀýΪ ¡£
(3)Éè¼ÆÒýÎïÊÇPCR¼¼Êõ¹Ø¼ü²½ÖèÖ®Ò»¡£Ä³Í¬Ñ§Éè¼ÆµÄÒ»×éÒýÎï(Ö»±ê×¢Á˲¿·Ö¼î»ùÐòÁÐ)²»ºÏÀí(ÈçÏÂͼ)£¬Çë˵Ã÷ÀíÓÉ ¡£
![]()
£¨4£©ÔÚDNA¾ÛºÏøµÄ×÷ÓÃÏ£¬Á½Ìõ×ÓÁ´µÄÑÓÉì·½Ïò¶¼ÊÇ ¡£
£¨5£©¼ÙÈçÒýÎï¶¼ÓÃ3H±ê¼Ç£¬´ÓÀíÂÛÉϼÆË㣬ËùµÃDNA·Ö×ÓÖк¬ÓÐ3H±ê¼ÇµÄÕ¼ ¡£
£¨6£©ÓëÌåÄÚDNA¸´ÖÆÏà±È£¬PCR·´Ó¦Ìåϵ³ýÒýÎïÍ⣬»¹Ðè¼ÓÈëÄÄÖÖÌØ±ðµÄÎïÖÊ£¿ ¡£
£¨6·Ö£©(1)DNA»òRNA £¨2£©50%
(3)ÒýÎï¢ñ¡ä×ÔÉíÕÛµþºó»á³öÏÖ¾Ö²¿¼î»ù»¥²¹Åä¶Ô¶øÊ§Ð§
£¨4£©´Ó×ÓÁ´µÄ5¡ä¶ËÏò3¡ä¶ËÑÓÉ죨5£©100£¥£¨6£©Taq ø
¡¾½âÎö¡¿»ùÒòÀ©ÔöÖÐÒýÎïͨ³£ÊÇһС¶ÎDNA»òRNAƬ¶Î£¬µÚ¶þÂÖÖк¬ÒýÎïII£¨»ò¿¼ÌâÖеÄÒýÎïA£©±ÈÀýΪ3/4£¬µÚÈýÂÖÖÐÕ¼7/8£¬¼´ËùÓÐDNAƬ¶ÎÖУ¬Ö»ÓÐÒ»¸öƬ¶Î²»º¬ÒýÎïII£¬¹ÊÍÆ²âÔÚµÚËÄÂÖÖУ¬º¬ÒýÎïII£¨»òÒýÎïA£©µÄ±ÈÀýΪ15/16¡£ÓëÁ½ÌõÍÑÑõºËÜÕËáÁ´µÈ³¤µÄDNAƬ¶ÎËùÕ¼DNA×ÜÊýµÄ±ÈÀýΪ50%£¬ÓÉÓÚÌâͼÖеÄÒýÎïAºÍÒýÎïB¾ù²»ÔÚ¸ÃÆ¬¶ÎµÄ¶Ëµã£¬Òò´ËµÚÒ»ÂÖÑ»·ºó£¬µÃµ½µÄÁ½DNAƬ¶ÎÖÐÁ½ÌõÍÑÑõºËÜÕËáÁ´¶¼²»µÈ³¤£¬Í¨¹ý×ÔÐлæÍ¼¿ÉÍÆÖª£¬µÚ¶þÂÖÖÐÒ಻»á³öÏֵȳ¤µÄÒýÎïÊÇPCRÌØÒìÐÔ·´Ó¦µÄ¹Ø¼ü£¬PCR ²úÎïµÄÌØÒìÐÔÈ¡¾öÓÚÒýÎïÓëÄ£°åDNA»¥²¹µÄ³Ì¶È¡£ÀíÂÛÉÏ£¬Ö»ÒªÖªµÀÈκÎÒ»¶ÎÄ£°åDNAÐòÁУ¬ ¾ÍÄܰ´ÆäÉè¼Æ»¥²¹µÄ¹ÑºËÜÕËáÁ´×öÒýÎÀûÓÃPCR¾Í¿É½«Ä£°åDNAÔÚÌåÍâ´óÁ¿À©Ôö¡£Éè¼ÆÒýÎïÓ¦×ñÑÒÔÏÂÔÔò£º
1¡¢ÒýÎﳤ¶È£º 15-30bp£¬³£ÓÃΪ20bp×óÓÒ¡£
2¡¢ÒýÎïÀ©Ôö¿ç¶È£º ÒÔ200-500bpΪÒË£¬Ìض¨Ìõ¼þÏ¿ÉÀ©Ôö³¤ÖÁ10kbµÄƬ¶Î¡£
3¡¢ÒýÎï¼î»ù£ºG+Cº¬Á¿ÒÔ40-60%ΪÒË£¬G+CÌ«ÉÙÀ©ÔöЧ¹û²»¼Ñ£¬G+C¹ý¶àÒ׳öÏÖ·ÇÌØÒìÌõ´ø¡£ATGC×îºÃËæ»ú·Ö²¼£¬±ÜÃâ5¸öÒÔÉϵÄàÑßÊ»òà×ऺËÜÕËáµÄ³É´®ÅÅÁС£
4¡¢±ÜÃâÒýÎïÄÚ²¿³öÏÖ¶þ¼¶½á¹¹£¬±ÜÃâÁ½ÌõÒýÎï¼ä»¥²¹£¬ÌرðÊÇ3'¶ËµÄ»¥²¹£¬·ñÔò»áÐγÉÒýÎï¶þ¾ÛÌ壬²úÉú·ÇÌØÒìµÄÀ©ÔöÌõ´ø¡£
5¡¢ÒýÎï3'¶ËµÄ¼î»ù£¬ÌرðÊÇ×îÄ©¼°µ¹ÊýµÚ¶þ¸ö¼î»ù£¬Ó¦ÑϸñÒªÇóÅä¶Ô£¬ÒÔ±ÜÃâÒòÄ©¶Ë¼î»ù²»Åä¶Ô¶øµ¼ÖÂPCRʧ°Ü¡£
6¡¢ÒýÎïÖÐÓлòÄܼÓÉϺÏÊʵÄøÇÐλµã£¬ ±»À©ÔöµÄ°ÐÐòÁÐ×îºÃÓÐÊÊÒ˵ÄøÇÐλµã£¬ Õâ¶ÔøÇзÖÎö»ò·Ö×Ó¿Ë¡ºÜÓкô¦¡£
PCR¼¼ÊõÀ©ÔöDNAÐè¼ÓÈëÌØ¶¨µÄTaqø¡£¸´Öƹý³Ì×ÓÁ´µÄºÏ³É·½ÏòÊÇ´Ó×ÓÁ´µÄ5¡ä¶ËÏò3¡ä¶ËÑÓÉì