[题目]科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图1.图2表示目的基因及限制酶切点.图3表示质粒.据图回答:(1)重组细胞的细胞核来自细胞.(2)将基因导入ES细胞而不是导入上皮细胞是因为ES细胞具有 .(3)步骤③.需要构建含有干扰素基因 .(4)从基因组数据库中查询干扰素基因的核苷酸序� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

【题目】科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图1。图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示质粒，据图回答：

（1）重组细胞的细胞核来自______________细胞。

（2）将基因导入ES细胞而不是导入上皮细胞是因为ES细胞具有______________。

（3）步骤③，需要构建含有干扰素基因______________。

（4）从基因组数据库中查询干扰素基因的核苷酸序列，以便根据真训练设计合成引物用于PCR扩增，PCR扩增过程至少第____________轮循环后才能获得纯目的基因片段（仅含引物之间的序列）。

（5）对于干扰素基因片段和质粒进行双酶切时，可选用限制酶的组合为____________或____________。

（6）将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发___________色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达，可以采用___________的方法。

【答案】（1）（干扰素基因缺失小鼠的）上皮细胞（2）全能性（3）基因表达载体

（4）3（2分）（5）HindIII和PstI EcoRI和PstI （6）绿抗原—抗体杂交

【解析】

试题分析：：（1）重组细胞的细胞核来自上皮细胞

（2）将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为ES细胞具有全能性．

（3）步骤③是将目的基因导入ES细胞，该过程之前需要构建基因表达载体；

（4）因为前两轮循环扩增产物上目的基因上都带有模板DNA其他片段，即扩增产物比目的基因的DNA片段长，第三轮就有了纯目的基因片段了

（5）由图可知，SamⅠ酶的识别序列和切割位点位于目的基因上，用该酶切割会破坏目的基因，因此对干扰素基因片段和质粒进行酶切时，可选用限制酶HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ

（6）用限制酶HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ切割时会破坏红色荧光蛋白基因，但不会破坏绿色荧光蛋白基因，因此将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发绿色荧光的细胞进行体外诱导．为检测干扰素基因是否表达，可以采用抗原-抗体杂交法

练习册系列答案

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项目	5℃	10℃	20℃	25℃	30℃	35℃
光照条件下CO2吸收量/mg·h－1	1	1．8	3．2	3．7	3．5	3
黑暗条件下CO2吸收量/mg·h－1	0．5	0．75	1	2．3	3	3．5

①光照条件下植物吸收的CO2在________（细胞具体结构）参与反应，而黑暗条件下CO2是由________（细胞具体结构）释放的。

②温度在25～30℃间光合作用制造的有机物总量逐渐________（增加、减少）。

③假设呼吸作用昼夜不变，植物在25℃时，一昼夜中给植物光照15 h，则一昼夜积累的有机物的量为________。

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第二步：往标号的6只烧瓶分别添加湖水水样300mL；在往1、2、3号瓶各加入30mL蒸馏水，4、5、6号瓶各加入30mL轮叶黑藻浸提液。

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烧瓶	2天		4天		6天
烧瓶	叶绿素a含量	叶绿素a平均含量	叶绿素a含量	叶绿素a平均含量	叶绿素a含量	叶绿素a平均含量
1	2．10	2．00	2．40	2．40	2．58	2．60
2	1．98		2．39		2．59
3	1．92		2．41		2．63
4	1．50	1．60	1．20	1．20	0．51	0．52
5	1．60		1．30		0．55
6	1．70		1．10		0．50