题目内容
【题目】为了培育新品种,研究者从其他植物中获取基因C(图1),拟将其与质粒(图2)重组,再去转化棉花细胞和小鼠细胞。回答下列问题：
（1）构建含C基因的表达载体时,需选择图2中的____________限制酶切割质粒。构建基因表达载体的目的是__________________________________________。
（2）在_______________条件下，将被C基因转化的棉花细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。人工配制的培养基中必须有一定的营养和激素，实验过程中发现部分接种在无激素培养基上的芽也能长根,其原因是__________________________________________。
（3）若将被C基因转化的小鼠细胞进行细胞培养，在传代培养时常用______________分散细胞，该过程中不能用胃蛋白酶代替，原因是________________________________。
【答案】EcoRⅠ 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用 无菌和人工控制 芽顶端合成的生长素向基部运输,促进根的分化 胰蛋白质酶 细胞培养的适宜pH为7.2-7.4，胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性，所以用胃蛋白酶不行
【解析】
基因工程的操作步骤：获取目的基因（基因文库、PCR、人工合成）；构建基因表达载体（含标记基因、启动子、终止子、目的基因、复制原点等）；把目的基因导入受体细胞（显微注射法、农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法、钙离子处理法）；目的基因的检测和鉴定（分子水平和个体水平检测，前者包括DNA分子杂交、分子杂交和抗原抗体杂交；后者如抗虫抗病接种实验）。
（1）根据目的基因的两端存在EcoRⅠ酶切位点可知，应该选择EcoRⅠ对质粒和目的基因进行切割，进而构建基因表达载体。构建基因表达载体可以使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。
（2）要被C基因转化的棉花细胞培养成完整植株，需要经过植物组织培养，该过程需要在离体、无菌、人工控制的条件下进行。芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化，故部分接种在无激素培养基上的芽也能长根。
（3）可以用胰蛋白酶或胶原蛋白酶对动物细胞进行分散培养，由于细胞培养的适宜pH为7.2-7.4，胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性，所以不能用胃蛋白酶分散细胞。
全能测控一本好卷系列答案
【题目】癌症是当前严重危害人类健康的重大疾病。incident研究人员利用与癌细胞在某些方面具有相似性的诱导多能干细胞（iPSC）进行了抗肿瘤的免疫学研究。
（1）环境中的致癌因子会损伤细胞中的DNA分子，使________________基因发生突变，导致细胞癌变。与正常细胞相比，癌细胞膜上的____________等物质减少，使得癌细胞容易在体内分散和转移。
（2）研究人员进行如下实验：
免疫组小鼠：每周注射1次含失去增殖活性的iPSC悬液，连续4周；
空白组小鼠：每周注射1次不含失去增殖活性的iPSC的缓冲液，连续4周。
实验一：取免疫组和空白组小鼠的血清分别与iPSC、DB7（一种癌细胞）和MEF（一种正常体细胞）混合，检测三种细胞与血清中抗体的结合率，结果见下表。
细胞 细胞与抗体的结合率(%) 血清 | iPSC | DB7 | MEF |
免疫组 | 77 | 82 | 8 |
空白组 | 10 | 8 | 9 |
①比较表中iPSC与两组小鼠血清作用的结果可知，免疫组的数值明显高于空白组的数值，说明iPSC刺激小鼠产生了____________免疫。
②表中DB7和iPSC与免疫组小鼠血清作用后的检测数据无明显差异，说明DB7具有可以与抗iPSC的抗体结合的__________，iPSC具有潜在的预防和治疗癌症的应用前景。
实验二：为了验证iPSC也能刺激机体产生特异性抗肿瘤的细胞免疫。研究人员另取小鼠进
行实验，下图为实验组的实验过程及结果示意图。请在下图中选择A～F填入①～④处，则③___________，④__________。
