Question

（05天津卷）（18分）

（1）限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是―G^↓GATCC―，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是―^↓GATC―。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

 

②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。

 

③在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？为什么？

Answer 1

答案：

①

②

③可以连接。因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的）

解析：限制性内切酶能识别DNA分子上特定的序列和切点并进行切割，限制性内切酶具有专一性，即一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列。被限制内切酶切开的DNA两条单链切口，各含有几个伸出的、可互补配对的核苷酸，这种切口就是黏性末端。黏性末端之间，只要切口处伸出的核苷酸间存在互补，就能在DNA连接酶的作用下连接起来。虽然限制性内切酶I和限制性内切酶II识别的序列和切点是不同的，但是形成的黏性末端是相同的，存在着互补关系，因此在DNA连接酶的作用下是可以连接起来的。