题目内容
【题目】回答下列（一）、（二）小题：
(一)．某研究小组欲利用苹果生产苹果酒和苹果醋。回答下列问题：
（1）欲纯化野生酵母，最简单的分离方法是 ____，经过培养后，培养基上出现____，表示分离成功。
（2）在酿制苹果酒时，加入果胶酶将果胶分解成可溶性的____，瓦解植物的胞间层，提高果汁的出汁率和澄清度。为提高果酒的酒精度，可在果汁中添加____。
（3）为提高生产效率，做了以下对比实验。甲发酵罐中保留一定量的氧气，乙发酵罐中没有氧气，其余条件相同且适宜，定期测得的数据如图所示。
甲发酵罐提供氧气的目的是____。实验后检测发现，尽管酵母菌菌种合适、原料充足、发酵温度和pH适宜，但乙醇含量比预期低，可能在操作上的失误是____。
（4）利用苹果酒酿制苹果醋的过程中，相关说法错误的是____。
A．苹果酒一般需稀释后用于果醋发酵
B．醋化醋杆菌需用液体培养基扩大培养后接种
C．菌种和锯末混匀后立即打开双通活塞，进行发酵
D．监控果醋发酵情况时需每天用pH试纸检测流出液的pH
（二）．科学家将蜘蛛的蛛丝蛋白基因导入山羊体内，得到转基因山羊，使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白，生产原理见下图。请回答：
(1)将蛛丝蛋白基因和载体通过甲过程形成的X物质为____，可用____法将X导入受体细胞。
(2)为了获得蛛丝蛋白，图中的受体细胞应该选择 ____羊（填性别）的体细胞，要使重组细胞具有全能性，乙过程需要的技术操作是____。
(3)下列关于丙过程的叙述，正确的是____。
A．该过程所用培养液的成分与乙过程相同
B．该过程需定期用胰酶处理成细胞悬液进行传代培养
C．该过程为动物细胞培养，目的是获得更多的重组细胞
D．该过程中供体核DNA上原有的调节蛋白会被卵细胞质中的蛋白因子替换
(4)为了快速繁殖转基因山羊，可在丁过程前对早期胚胎进行____，经培养后再分别移植到同期发情处理的____的代孕母羊的相应部位。
【答案】 划线分离 单菌落 半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯 蔗糖 使酵母菌进行需氧呼吸，快速繁殖 密封不严 C 重组DNA分子 显微注射 雌 核移植 D 胚胎分割 未经配种
【解析】试题分析：酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下进行有氧呼吸，反应式是：C6H12O6+6H2O+6O2
6CO2+12H2O+能量，无氧条件下进行无氧呼吸，无氧呼吸的产物是酒精和二氧化碳，反应式是：C6H12O6
2CO2+2C2H5OH+能量。分析题（二）图，甲表示构建基因表达载体，X表示重组DNA分子；乙表示核移植技术；丙表示动物细胞培养或早期胚胎培养；丁表示胚胎移植。
(一)．（1）欲纯化野生酵母，常用平板划线法或者稀释涂布平板法进行接种，其中平板划线法最简单；经过培养后，观察培养基上微生物的单菌落，从中选出酵母菌。
（2）果胶酶可将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯，瓦解植物的胞间层，提高果汁的出汁率和澄清度。为提高果酒的酒精度，可在果汁中添加蔗糖。
（3）甲发酵罐提供氧气的目的是让酵母菌进行有氧呼吸，快速繁殖，以增加酵母菌的数量；实验后检测发现，尽管酵母菌菌种合适、原料充足、发酵温度和pH值适宜，但酒精含量比预期低，在操作上的失误可能是密封不严，导致酵母菌无氧呼吸受到抑制。
（4）苹果酒一般需稀释后用于果醋发酵，A正确；醋化醋杆菌需用液体培养基扩大培养后接种，B正确；醋酸杆菌是好氧菌，和锯末混匀后，过一段时间打开双通活塞，进行发酵，C错误；监控果醋发酵情况时需每天用pH试纸检测流出液的pH，D正确。
(二)．（1）根据以上分析已知，图中X表示重组DNA分子，将其导入动物细胞常用显微注射法。
（2）根据题意分析，该实验的目的是从羊奶中提取独特的蛛丝蛋白，因此图中的受体细胞应该选择雌羊的体细胞；由于体细胞核的全能性受到了限制，因此应该将体细胞核通过核移植技术移植到去核的卵母细胞中去，获得的重组细胞才能具有表达细胞核的全能性的能力。
（3）根据以上分析已知，乙、丙分别表示核移植技术和早期胚胎培养技术，两者需要的培养液的成分不完全相同；该过程需要培养成早期胚胎，不能用胰蛋白酶分散成单个细胞，B错误；该过程为动物细胞培养，目的是获得早期胚胎，C错误；该过程中供体核DNA上原有的调节蛋白会被卵细胞质中的蛋白因子替换，D正确。
（4）为了快速繁殖转基因山羊，可在丁过程前对早期胚胎进行胚胎分割，经培养后再分别移植到同期发情处理的未经配种的代孕母羊的相应部位。
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