题目内容
【题目】Bt基因即是苏云金芽胞杆菌(Badcillus thuringiensis,简称Bt)基因,因其表达产物Bt毒蛋白杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的转杀虫基因.如图为培育转Bt基因苗的基本操作过程.
(1)Bt基因可从构建的Bt基因组文库中获取,也可以从其cDNA文库中获取,从前者获取的基因(填“含有”或“不含有”)启动子.若利用PCR技术从cDNA文库中获取Bt基因(基因序列未知),需根据Bt蛋白氨基酸序列设计引物,引物的序列可以有多种,原因是 . 在PCR体系中需加入其中的(填“全部”或“任意1种”或“其中2种”)引物,若Bt基因序列已知,则引物的序列通常为种.
(2)在构建基因表达载体的过程中,为了方便筛选含有目的基因的细胞,作为运载体的Ti质粒应含有基因,其中是驱动基因转录的酶识别和结合的位点,而能帮助目的基因整合到宿主细胞染色体上的序列称为 . 图示将目的基因导入受体细胞的方法是 .
(3)步骤Ⅳ中产生的细胞团称为 , 步骤Ⅳ和Ⅴ过程要注意控制培养基中的浓度比例,以便获得幼苗.
【答案】
(1)含有;一种氨基酸可能有多种密码子,对应生物DNA碱基序列就会有多种;全部;2
(2)标记基因(抗性基因);启动子;T﹣DNA(可转移DNA);农杆菌转化法
(3)愈伤组织;生长素与细胞分裂素
【解析】解:(1)Bt毒蛋白基因属于目的基因,目的基因可从基因组文库中获取,也可从cDNA文库中获取,含有基因中启动子的文库是基因组文库.若利用PCR技术从cDNA文库中获取Bt基因,需根据Bt蛋白氨基酸序列设计引物,引物的序列可以有多种,原因是一种氨基酸可能有多种密码子,对应生物DNA碱基序列就会有多种.在PCR体系中需加入其中的全部引物,若Bt基因序列已知,则引物的序列通常为2种.(2)标记基因是作用是鉴别和筛选含有目的基因的受体细胞;启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的位点,驱动转录;T﹣DNA的作用是帮助目的基因整合到宿主细胞染色体上;将目的基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法.(3)步骤Ⅳ中产生的细胞团称为愈伤组织,步骤Ⅳ和Ⅴ过程要注意控制培养基中生长素与细胞分裂素的浓度比例,以便获得幼苗. 所以答案是:(1)含有;一种氨基酸可能有多种密码子,对应生物DNA碱基序列就会有多种;全部;2;(2)标记基因(抗性基因);启动子;T﹣DNA(可转移DNA);农杆菌转化法;(3)愈伤组织;生长素与细胞分裂素
【考点精析】解答此题的关键在于理解基因工程的原理及技术的相关知识,掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术.